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凱氏定氮法

時間：2011/12/23閱讀：2107
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                                                                               凱氏定氮法

凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收，再以標準堿滴定，就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定量方法。

    凱氏定氮法是基于待測天然含氮有機物與濃硫酸共熱時，會被氧化成為二氧化碳和水，
然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。 　　
1. 有機物中的胺根在強熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4
       反應式為：2NH2+H2S04+2H＝（NH4）2S04 （其中CuSO4做催化劑） 　　
2.在凱氏定氮器中與堿作用，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中 　　
       反應式為：（NH4）2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4 　　
                 2NH3+4H3BO3＝（NH4）2B4O7+5H2O 　　
    3. 用已知濃度的H2SO4（或HCI）標準溶液滴定，根據HCI消耗的量計算出氮的含量，然    后乘以相應的換算因子，既得蛋白質的含量 　　
       反應式為：（NH4）2B4O7+H2SO4+5H2O＝（NH4）2SO4+4H3BO3 　　
                 （NH4）2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3

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