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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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ELISA試劑盒生產(chǎn)流程及注意事項(xiàng)

時(shí)間:2018/4/2閱讀:3772
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 1. ELISA試劑盒生產(chǎn)流程

2,包被

2.1 將包被抗原用包被緩沖液配制包被液,每孔取100 mL加入酶標(biāo)板,蓋好蓋板膜,包被條件如下表,4℃ 16-20h包被時(shí)酶標(biāo)板可以疊放,而37℃ 2h包被時(shí)酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致(一般為5cm)。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計(jì)調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距,如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱,則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm 。

2.2  包被加樣采取吸二打一的方式,應(yīng)避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷,若應(yīng)加入,則小心振蕩使其落入孔底,反之則用吸水紙小心吸出,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。

2.3  包被前預(yù)吸查看槍頭是否合格,水流是否一致,不一致者應(yīng)更換槍頭,包被應(yīng)采用槍頭,每包被一塊板,應(yīng)將槍頭套緊,并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致,在包被過程中若出現(xiàn)任何小問題,都應(yīng)將此塊板做出記號(hào),以便后期組裝入庫(kù)時(shí)淘汰。

2.4 若采用37℃ 2h包被模式,則應(yīng)給酶標(biāo)板編碼,保證每塊板子的包被時(shí)間一致。

3,洗板

3.1 包被后要進(jìn)行兩次洗滌,250微升/孔,洗滌完畢后,應(yīng)在毛巾上拍干參與液體,并及時(shí)進(jìn)行下一步封閉。

3.2 洗滌時(shí)要注意查看水流是否一致,在洗滌程中若出現(xiàn)任何小問題,都應(yīng)將此塊板做出記號(hào),以便后期組裝入庫(kù)時(shí)淘汰。

4,封閉

4.1 封閉液應(yīng)提前一小時(shí)取出初步回溫,用前搖勻,每孔取180 mL加入酶標(biāo)板,蓋好蓋板膜,37℃封閉 1.5h, 酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致(一般為5cm)。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計(jì)調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距,如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱,則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm 。

4.2  封閉加樣采取吸一打一的方式,應(yīng)避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷,若應(yīng)加入,則小心振蕩使其落入孔底,反之則用吸水紙小心吸出,殘留在槍頭內(nèi)的溶液不要打出 以免產(chǎn)生氣泡。并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡

4.3 封閉前預(yù)吸查看槍頭是否合格,水流是否一致,不一致者應(yīng)更換槍頭,封閉應(yīng)采用槍頭,每封閉一塊板,應(yīng)將槍頭套緊,并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致,在封閉過程中若出現(xiàn)任何小問題,都應(yīng)將此塊板做出記號(hào),以便后期組裝入庫(kù)時(shí)淘汰。

5,烘干裝袋

5.1 封閉完后,摔倒孔內(nèi)液體,并在毛巾上拍干,接下來采取烘干或者晾干的方式*干燥酶標(biāo)板。烘干:37 ℃倒置(不加蓋板膜或用自封袋),每5塊板烘干30 min,隨著板子數(shù)量增多時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng),如100塊板,需要烘3 h,依次類推;晾干:底部鋪一層干凈的A4紙或者吸水紙,倒置板子,在頂層鋪一層蓋住避光,室溫晾18-24h。

5.2 板子干燥后,應(yīng)及時(shí)裝入自封袋,按照每塊板1袋干燥劑的量裝入,袋子外面寫好板子制備日期,放入本成品庫(kù)冷藏環(huán)境保存?zhèn)溆谩?nbsp;

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