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試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中山羊內(nèi)啡肽（EP）水平。
用純化的山羊內(nèi)啡肽（EP）抗體包被微孔板，ELISA試劑盒制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)啡肽（EP），再與HRP標記的內(nèi)啡肽（EP）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。
TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的。
顏色的深淺和樣品中的內(nèi)啡肽（EP）呈正相關。
ELISA試劑盒用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中山羊內(nèi)啡肽（EP）濃度。
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