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IL-8簡介: 
    IL-8是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的單核因子,是趨化因子家族C-X-C亞族(α亞族)中的一員,對中性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞具有趨化作用,能夠吸附中性粒細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞和T細(xì)胞,但是單核細(xì)胞除外。人的IL-8 cDNA 序列表明有99個(gè)氨基酸殘基。經(jīng)過剪節(jié)掉22個(gè)個(gè)殘基后,形成成熟的具有77個(gè)氨基酸的蛋白。IL-8還能夠調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞成熟分化,在炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)中起重要作用,并且研究表明IL-8還具有促進(jìn)血管生成的作用。IL-8在人體內(nèi)存在兩種主要形式,一種是來源于單核細(xì)胞含72個(gè)氨基酸的多肽,另一種是來源于內(nèi)皮細(xì)胞含77個(gè)氨基酸的多肽。72aa比77aa的IL-8具有更高的趨化活性,而77aa的IL-8具有誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的功能,其位于N端的五肽序列已被確定是IL-8具有誘導(dǎo)凋亡功能的活性部位。 
檢測原理: 
    我司提供的人白介素8Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中IL-8 的濃度。IL-8 捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí),其中的IL-8 會與捕獲抗體結(jié)合,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-8 抗體后,抗人IL-8 抗體與IL-8 接合,形成夾心的免疫復(fù)合物,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合,親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來;其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。zui后加入顯色劑,若樣本中存在IL-8 將會形成免疫復(fù)合物,辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈。通過酶標(biāo)儀檢測,讀其450nm處的OD值,IL-8 濃度與OD450值之間呈正比,通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照未知樣本中OD值,即可算出標(biāo)本中IL-8 濃度。

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