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技術(shù)文章
細(xì)胞分離技術(shù)
點擊次數(shù)：1496 發(fā)布時間：2016-9-21
離心是研究如細(xì)胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體，以及各種大分 子基本手段。一般認(rèn)為，轉(zhuǎn)速為10~25Kr/min的離心機(jī)稱為高速離心機(jī)；轉(zhuǎn)速超過25Kr/min，離心力大于89Kｇ者稱為超速離心機(jī)。目前超速 離心機(jī)的zui高轉(zhuǎn)速可達(dá)100Kr/min，離心力超過500Kg。
在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級離心，用于分離不同大小的細(xì)胞和細(xì)胞器。在差速離心中細(xì)胞器沉降的順序依次為：核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、zui后為核蛋白體。
由于各種細(xì)胞器在大小和密度上相互重疊，而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中，一般重復(fù)2～3次效果會好一些。
差速離心只用于分離大小懸殊的細(xì)胞，更多用于分離細(xì)胞器。通過差速離心可將細(xì)胞器初步分離，常需進(jìn)一步通過密度梯離心再行分離純化。