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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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紫外分析儀日常維護(hù)保養(yǎng)方法

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紫外分析儀分為很多系列,有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引電泳分析、檢測,PCR產(chǎn)物檢測,DNA紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。圖片僅介紹了三用紫外分析儀的外形。

日常維護(hù)保養(yǎng)方法

1. 本儀器應(yīng)放置在陰涼、干燥、無灰塵和無酸堿、蒸汽的地方,儀器使用環(huán)境應(yīng)清潔。長時(shí)間不用應(yīng)拔下電源插頭,并蓋上防護(hù)罩;

2. 不要將水和液體濺到儀器上;

3. 燈箱上放置被觀察物的玻璃如有污穢,可用酒棉擦干凈。

原理及其應(yīng)用

紫外分析儀是熒光的應(yīng)用,熒光是什么呢? 了解下什么是熒光,熒光又作"螢光",是種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當(dāng)某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱之為熒光。 知道了什么是熒光,顧名思義就能想到什么是熒光。熒光是某些物質(zhì)受定波長的光激發(fā)后,在短時(shí)間內(nèi)(10-8秒)會(huì)發(fā)射出波長大于激發(fā)波長的光,這種光稱為熒光。這發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應(yīng)用及有關(guān)的方法稱為熒光(fluorescent technique)。

物質(zhì)經(jīng)過紫外線照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象可分為兩種情況,*種是自發(fā)熒光,如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后,能發(fā)出紅色的熒光,稱為自發(fā)熒光;二種是誘發(fā)熒光,即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過紫外線照射發(fā)出熒光,稱為誘發(fā)熒光。

熒光在生物化學(xué)及分子生物學(xué)研究中應(yīng)用主要包括以下幾個(gè)方面:

1、物質(zhì)的定性:不同的熒光物質(zhì)有不同的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可用熒光行物質(zhì)的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更的選擇性。

2、定量測定:利用在較低濃度下熒光強(qiáng)度與樣品濃度成正比這關(guān)系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測定氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量。熒光定量測定的個(gè)優(yōu)點(diǎn)是靈敏度,例如維生素B2的測定*可達(dá)1毫微克/毫升,這優(yōu)點(diǎn)使測定時(shí)所需要樣品量大大減少。 這種定量測定方法還可應(yīng)用于酶催化的反應(yīng),只要反應(yīng)前后有熒光強(qiáng)度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應(yīng)的速率等。

3、研究生物大分子的物理化學(xué)性及其分子的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象:熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率和熒光壽命等參數(shù)不僅和分子內(nèi)熒光發(fā)色基團(tuán)的本身結(jié)構(gòu)有關(guān),而且還強(qiáng)烈地依賴于發(fā)色團(tuán)周圍的環(huán)境,即對(duì)周圍環(huán)境十分敏感。利用此點(diǎn)可通過測定上述有關(guān)熒光參數(shù)的變化來研究熒光發(fā)色團(tuán)所在位的微環(huán)境的征及其變化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的熒光發(fā)色團(tuán)(如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等,此類熒光稱為內(nèi)源熒光)以外,可將些殊的熒光染料分子共價(jià)地結(jié)合或吸附在生物大分子的某位,通過測定該染料分子的熒光性變化來研究生物大分子,這種染料分子被稱為"熒光探針",它們發(fā)出的熒光般稱為外源熒光。熒光探針的應(yīng)用,大大地開拓了熒光在分子生物學(xué)中的應(yīng)用范圍。

 

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