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國內人血漿內毒素檢測的實驗操作方法

時間:2022/11/30閱讀:1038
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一、樣品的前處理
1、0.5ml人血漿S),按如下方法稀釋0. 5mlS+0.5mID+1.5mlW2.5mlS5
式中D為專用的稀釋劑W為專用的細菌內毒素檢測BET用水;S5為稀釋了5倍的血漿,下標數(shù)字表示稀釋倍數(shù)。
2、把裝有S5的小瓶置70℃的水浴中10分鐘。
3、把經加熱處理的裝有S5的小瓶用3000rpm離心10分鐘,然后吸取上清液仍記為S5 BET。
4、如果不立即作BET,可把經離心的裝有S5的小瓶置2 ~3℃冰箱保存,可在3天內作BET。
 


 

二、稀釋標準內毒素
1、取效價為10Eu的標準內毒素CSE一支開啟,加入0. 1mlW溶解然后用封口膜封閉瓶口。
2、把裝CSE安瓿放在旋渦混合器上強烈混合10分鐘得到濃度為10Eu/mlCSE溶液記為E10E表示CSE,下標數(shù)字表示濃度
3、按下步驟制備CSE濃度系列
 


 

以上均需在旋渦混合器混合。

  • 制備待測樣品

如下圖所示:
 


 

四、試劑TAL一支,按標示裝量加W復溶
 
五、試管設置與加樣
在電腦的“檢測"程序上按下述方法設置反應試管并取反應試管按下表要求加樣
 



 

六、檢測
把加好樣的試管按編號順序插入檢測儀器的反應孔中反應每支試管在插入反應孔前應輕輕晃動搖勻試管中的內容物。
 
結果處理
1、反應的數(shù)據采集、處理、結果表達等均由檢測儀自動完成。
2、日常的檢測只需要設置編號1,2,910,11,12號的反應試管,利用儲存的標準曲線即可。


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