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Top-Down蛋白質(zhì)組學的優(yōu)勢和局限

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百泰派克生物科技-生物藥物表征,生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd. 簡稱BTP)從事以生物質(zhì)譜為依托的生物藥物表征,大分子物質(zhì)(包括蛋白質(zhì)、多肽、代謝物)質(zhì)譜分析以及小分子物質(zhì)檢測服務。

l 公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,專業(yè)提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務;

l 獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務;

l 業(yè)務范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;

l 7大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

l 服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

l 致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!






業(yè)務范圍主要圍繞蛋白和小分子代謝物檢測兩大板塊,從事蛋白質(zhì)和小分子代謝物的理化性質(zhì)分析及結(jié)構(gòu)解析等相關技術服務,為客戶提供高性價比、高效率的技術服務。

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Top-Down蛋白質(zhì)組學的優(yōu)勢和局限檢測技術服務詳情介紹

Top-Downdànbáizhì組學的優(yōu)勢與局限:完整結(jié)構(gòu)信息的代價與突破

隨著dànbáizhì組學研究不斷邁向更高分辨率與更細結(jié)構(gòu)層級,Top-Downdànbáizhì組學(Top-Down Proteomics, TDP)因其對完整dànbáizhì進行直接質(zhì)譜分析的能力,正在成為研究dànbáizhì異構(gòu)體、翻譯后修飾及功能多樣性的關鍵工具。然而,這項技術雖具有諸多dútè優(yōu)勢,也存在一定的技術與應用局限。本文將從科學視角出發(fā),系統(tǒng)總結(jié)Top-Downdànbáizhì組學的核心優(yōu)勢與當前瓶頸,并探討其未來發(fā)展趨勢。


一、Top-Downdànbáizhì組學的核心優(yōu)勢

1、全序列+翻譯后修飾同步獲取

Top-Down可直接分析未酶切的完整蛋白,天然保留所有翻譯后修飾(PTMs),包括磷酸化、乙酰化、糖基化、羥基化等。相比Bottom-Up的“肽段分析+拼接推測”,Top-Down提供的是原子級別的修飾位點和組合信息。


2、高分辨率識別蛋白異構(gòu)體(Proteoforms)

同一基因編碼的dànbáizhì,可能通過替代剪接、突變、翻譯后修飾等形成多個功能不同的“proteoform”。Top-Down能夠在一級質(zhì)譜上jīngzhǔn區(qū)分這些亞型,為研究dànbáizhì功能異質(zhì)性、疾病機制提供直接證據(jù)。


3、減少假陽性和鑒定歧義

Bottom-Up常因肽段重復性高、序列共享,導致蛋白鑒定存在“拼接錯誤”或“部分配對”的情況。而Top-Down通過完整質(zhì)量與序列碎片雙重識別,大幅降低鑒定歧義,特異性顯著提高。


4、適用于生物藥質(zhì)量控制與結(jié)構(gòu)驗證

在單克隆抗體、重組蛋白藥等領域,Top-Down可用于檢測氧化、裂解、糖型異構(gòu)體等微結(jié)構(gòu)差異,已成為FDA和EMA支持的藥品質(zhì)控手段之一。


5、數(shù)據(jù)更利于結(jié)構(gòu)-功能關系分析

因具備dànbáizhì“原始構(gòu)象”的視角,Top-Down更適合整合dànbáizhì與表型之間的關系,有利于發(fā)展結(jié)構(gòu)功能組學(structural-functional proteomics)。


二、Top-Downdànbáizhì組學的主要局限

1、對大分子蛋白識別能力有限

當前Top-Down分析zuì適宜dànbáizhì分子量為3–30 kDa,高于50 kDa的dànbáizhì在電噴霧離子化、色譜分離和碎裂效率上均存在明顯困難。因此,對于大分子蛋白和膜蛋白,依然面臨技術瓶頸。


2、色譜和質(zhì)譜儀器要求高,成本較大

Top-Down需配備高分辨質(zhì)譜儀(如Orbitrap Eclipse、FT-ICR)和高性能色譜系統(tǒng),同時對碎片模式(ETD/HCD/UVPD)支持程度要求jígāo,設備采購與運行維護成本高昂。


3、樣本前處理挑戰(zhàn)多,重復性需優(yōu)化

樣本必須低鹽、無變性、無聚合、無脂類污染,這對常規(guī)蛋白提取流程提出挑戰(zhàn)。且蛋白定量線性范圍有限、重復性較Bottom-Up稍差。


4、數(shù)據(jù)分析算法門檻高,標準化待完善

Top-Down譜圖復雜,需zhuānyè軟件(TopPIC、ProSight PC、ProteoformAI等)處理,且缺乏統(tǒng)一標準的質(zhì)量評估與比對流程,影響臨床應用轉(zhuǎn)化。


5、不適合高通量全組學篩選

雖然Top-Down單樣本解析能力強,但不適合一次性分析上千種dànbáizhì的全組學任務。因此,在全組水平研究中,常需與Bottom-Up策略聯(lián)合使用。


三、Top-Downdànbáizhì組學適合應用場景

1、蛋白藥結(jié)構(gòu)確認(抗體片段、融合蛋白)

2、毒液、天然活性蛋白、合成生物產(chǎn)品結(jié)構(gòu)分析

3、翻譯后修飾定位與功能研究

4、蛋白異構(gòu)體鑒定

5、jīngzhǔn標志物結(jié)構(gòu)驗證


Top-Downdànbáizhì組學以其對完整蛋白結(jié)構(gòu)的保留能力,彌補了Bottom-Up方法在翻譯后修飾識別和異構(gòu)體區(qū)分方面的不足,尤其適用于蛋白藥質(zhì)量控制、毒液蛋白解析和功能結(jié)構(gòu)研究等高精度場景。它不僅提供蛋白“看得見”的全貌,也為結(jié)構(gòu)-功能關系的深入理解打開新路徑。然而,Top-Down仍面臨樣本處理復雜、儀器要求高、數(shù)據(jù)解析難度大等現(xiàn)實挑戰(zhàn),短期內(nèi)尚難取代Bottom-Up在全組水平的高通量應用。在jīngzhǔndànbáizhì研究與結(jié)構(gòu)解析需求不斷提升的當下,Top-Down作為“深解析”技術的代表,將成為gāoduān蛋白組學平臺bùkěhuòquē的一環(huán)。百泰派克生物科技將持續(xù)推動Top-Down技術走向?qū)嵱没?,為科研與產(chǎn)業(yè)賦能。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。


※服務優(yōu)勢:

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務優(yōu)勢:

1.技術*,填補技術空白

采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術與其他技術結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

Top-Down蛋白質(zhì)組學的優(yōu)勢和局限




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務;

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務;

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!



Top-Down蛋白質(zhì)組學的優(yōu)勢和局限檢測技術服務詳情介紹



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