MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

多肽測序（Peptide Sequencing）通過測定dànbáizhì中肽段的氨基酸序列，科學(xué)家們能夠全面解析蛋白的功能、修飾及其在生命過程中的作用。隨著高分辨質(zhì)譜與計(jì)算算法的飛速發(fā)展，多肽測序不僅推動(dòng)了蛋白組學(xué)的深入發(fā)展，更在疾病機(jī)制研究、藥物研發(fā)、臨床診斷等領(lǐng)域發(fā)揮著舉足輕重的作用。串聯(lián)質(zhì)譜（Tandem Mass Spectrometry, MS/MS），憑借其高靈敏度、zhuóyuè的分辨率、序列解析能力和修飾識(shí)別優(yōu)勢，已成為多肽測序領(lǐng)域的核心技術(shù)。未來，隨著質(zhì)譜技術(shù)、AI算法和多維數(shù)據(jù)整合的不斷進(jìn)步，MS/MS在多肽測序中的核心作用與流程解析將在生命科學(xué)、jīngzhǔn醫(yī)學(xué)和生物制藥中扮演更加重要的角色。

一、MS/MS在多肽測序中的核心作用

MS/MS不僅是多肽鑒定的關(guān)鍵手段，更是實(shí)現(xiàn)肽段序列解析、翻譯后修飾定位、異構(gòu)體區(qū)分和復(fù)雜樣本解析的核心工具。其主要作用體現(xiàn)在：

1、提供肽段氨基酸序列信息

通過分析母離子（前體肽段）的碎片離子（b、y系列），推導(dǎo)完整氨基酸序列。

2、jīngzhǔn定位翻譯后修飾（PTMs）

如磷酸化、糖基化、乙?；刃揎椢稽c(diǎn)的識(shí)別與定位，解析蛋白功能調(diào)控機(jī)制。

3、區(qū)分同分異構(gòu)體和序列異構(gòu)肽段

通過高分辨碎片譜和保留時(shí)間結(jié)合，提高同序列不同結(jié)構(gòu)肽段的解析能力。

4、分析復(fù)雜生物樣品中的低豐度肽段

結(jié)合LC（液相色譜）和高分辨質(zhì)譜，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣本中低豐度肽段的jīngzhǔn檢測。

二、MS/MS多肽測序的詳細(xì)流程解析

MS/MS多肽測序流程主要包括 樣品前處理、酶解、分離、離子化、母離子選擇、碎片化、質(zhì)譜檢測、數(shù)據(jù)解析 八大步驟，每一環(huán)節(jié)都對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量起著決定性作用。

1、樣品前處理與蛋白酶解

（1）蛋白提取與純化：采用裂解液（含去垢劑、鹽、緩沖液）提取蛋白，結(jié)合超聲或機(jī)械破碎提高效率。

（2）定量與質(zhì)量控制：BCA、Bradford或紫外分光法定量，確保濃度適中，避免抑制離子化。

（3）酶解：常用yídànbáiméi（Trypsin），按1:501:100酶:底物比例，在37°C下酶解1216小時(shí)。對(duì)疏水肽段，可結(jié)合LysC、GluC等多酶策略。

2、液相色譜分離（LC）

（1）反相液相色譜（RP-LC）：利用疏水性差異分離肽段，降低樣品復(fù)雜度，提高信噪比。

（2）納升級(jí)流動(dòng)相：配合納流LC（nano-LC），實(shí)現(xiàn)低流速、高分離度，適合質(zhì)譜分析。

3、離子化（電噴霧/基質(zhì)輔助）

（1）電噴霧電離（ESI）：將液相中的肽段霧化為帶電離子，適合與LC在線耦合。

（2）MALDI（用于離線）：適用于樣品量少、復(fù)雜度低的樣本，但MS/MS中較少采用。

4、 母離子選擇與碎片化

（1）母離子選擇：根據(jù)m/z選擇特定肽段作為前體離子?？稍O(shè)定動(dòng)態(tài)排除，避免重復(fù)掃描。

（2）碎片化模式包括：

• CID（碰撞誘導(dǎo)解離）：與惰性氣體碰撞產(chǎn)生b、y離子。

• HCD（高能碰撞解離）：更高能量碎片化，生成更豐富碎片。

• ETD/ECD（電子轉(zhuǎn)移/俘獲解離）：保留修飾位點(diǎn)，適合磷酸化、糖基化等修飾解析。

5、 碎片離子檢測與質(zhì)譜分析

（1）高分辨質(zhì)譜儀：Orbitrap、FTICR等提供亞ppm質(zhì)量精度，確保序列解析和修飾定位準(zhǔn)確。

（2）動(dòng)態(tài)范圍與靈敏度：AGC（自動(dòng)增益控制）、動(dòng)態(tài)排除等策略，提升低豐度肽段檢測能力。

6、 數(shù)據(jù)分析與序列解析

（1）數(shù)據(jù)庫搜索：利用Mascot、MaxQuant、Byonic等軟件，將碎片譜與理論肽段匹配。需設(shè)置質(zhì)量偏差（MS1：±10 ppm；MS2：±0.02 Da）和修飾類型（如磷酸化、氧化）。

（2）de novo測序：當(dāng)數(shù)據(jù)庫中無參考序列時(shí)，直接推導(dǎo)氨基酸序列。

（3）修飾定位：結(jié)合碎片離子間質(zhì)量差異和離子強(qiáng)度，jīngquè定位PTMs。

（4） 多引擎與AI輔助分析：引入深度學(xué)習(xí)和多引擎結(jié)果交叉驗(yàn)證，提高復(fù)雜樣本解析能力。

三、MS/MS在多肽測序中的應(yīng)用與未來趨勢

1、蛋白zhìzǔxué：在血漿、組織、細(xì)胞裂解液中高通量解析蛋白組，應(yīng)用于疾病機(jī)制研究和新靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)。

2、翻譯后修飾解析：定位關(guān)鍵修飾位點(diǎn)，揭示信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝調(diào)控等功能機(jī)制。

3、新抗原與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)：MS/MS助力腫瘤miǎnyìzhìliáo、疫苗設(shè)計(jì)、疾病早篩。

4、單細(xì)胞與空間質(zhì)譜發(fā)展：推動(dòng)在單細(xì)胞、組織空間層次上進(jìn)行肽測序，揭示生物學(xué)復(fù)雜性。

5、AI與多技術(shù)融合：結(jié)合深度學(xué)習(xí)、質(zhì)譜成像（MSI）、原位分析（DESI-MS）等，推動(dòng)多肽測序走向自動(dòng)化、超高分辨率與多維數(shù)據(jù)整合。

百泰派克生物科技在多肽測序領(lǐng)域擁有*的技術(shù)平臺(tái)（Orbitrap Fusion Lumos、Q-Exactive HF-X、ETD/ECD模塊、MALDI-TOF/TOF）和自主研發(fā)的數(shù)據(jù)處理算法：全流程MS/MS測序服務(wù)，從樣品制備、酶解優(yōu)化到質(zhì)譜檢測、數(shù)據(jù)解析，全鏈路定制化服務(wù)。高靈敏度與分辨率，gāoduān儀器保障低豐度、多修飾肽段的準(zhǔn)確檢測。AI輔助與多引擎分析，結(jié)合MaxQuant、Byonic、深度學(xué)習(xí)算法，提高復(fù)雜樣品識(shí)別能力和結(jié)果精度。zhuānyè技術(shù)團(tuán)隊(duì)支持，經(jīng)驗(yàn)豐富的科學(xué)家團(tuán)隊(duì)，解決從樣品到結(jié)果的各類挑戰(zhàn)，助力客戶jīngzhǔn解析蛋白zhìzǔxué奧秘。致力于為全球科研人員與企業(yè)客戶提供高質(zhì)量、多維度的多肽測序解決方案，共同推動(dòng)蛋白組學(xué)與生物醫(yī)藥的創(chuàng)新進(jìn)步。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白zhìzǔxué分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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