核酸提取儀的校準(zhǔn)需依據(jù)JJF 1874-2020《(自動(dòng))核酸提取儀校準(zhǔn)規(guī)范》進(jìn)行，主要涵蓋以下關(guān)鍵內(nèi)容：

一、校準(zhǔn)適用范圍

?設(shè)備類型?：適用于全自動(dòng)/半自動(dòng)核酸提取儀，包括磁珠法和離心柱法原理的設(shè)備，通量范圍1-96樣本/批次。

?核心系統(tǒng)?：需校準(zhǔn)溫控系統(tǒng)、振蕩系統(tǒng)、取液系統(tǒng)及分離純化系統(tǒng)等模塊。

二、計(jì)量特性要求

需校準(zhǔn)以下關(guān)鍵參數(shù)：

?溫度相關(guān)?：示值誤差、均勻性、穩(wěn)定性（如37℃/95℃雙溫度點(diǎn)測(cè)試）；

?振動(dòng)頻率?：示值誤差及穩(wěn)定性（范圍0.1-500Hz）25；

?取液系統(tǒng)?：取液量示值誤差、重復(fù)性及一致性（使用電子天平，分度值0.1mg）；

?提取效率?：核酸回收率（需≥90%）、重復(fù)性及交叉污染率（棋盤法驗(yàn)證假陽(yáng)性率）。

三、校準(zhǔn)條件與設(shè)備

?環(huán)境要求?：溫度10-30℃、濕度≤80%，無(wú)機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾。

?標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備?：

溫度測(cè)量裝置（MPE±0.3℃）；

振動(dòng)頻率測(cè)量?jī)x（0.1級(jí)）；

電子天平（分度值0.1mg）；

核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（濃度≥1000ng/μL，Urel≤5%）。

四、典型校準(zhǔn)流程示例

?提取效率校準(zhǔn)?：

使用梯度濃度DNA標(biāo)準(zhǔn)品（10-10? copies/μL），提取后通過(guò)qPCR檢測(cè)回收濃度，計(jì)算效率η=(C提取后/C初始)×百分之一百。

?交叉污染驗(yàn)證?：

96孔板交替排布陽(yáng)性/陰性樣本，檢測(cè)陰性樣本假陽(yáng)性率。

?溫控模塊測(cè)試?：

探頭布點(diǎn)于加熱模塊幾何中心及邊緣，采樣間隔≤10s，判定ΔT=Tmax-Tmin。

五、常見(jiàn)問(wèn)題與整改

?提取效率低?：可能因磁棒磁力衰減（需≥800mT）或移液量偏差（如設(shè)定100μL實(shí)際80μL），需更換磁棒或校準(zhǔn)移液泵。

?交叉污染超標(biāo)?：多由吸頭更換機(jī)構(gòu)卡滯或廢液槽氣溶膠回流引起，需清潔機(jī)械導(dǎo)軌并增加紫外消殺。