BS6001 糖原合成酶試劑盒 糖原系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BS6001
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/7/18 7:57:43
- 訪問(wèn)次數(shù) 172
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
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貨號(hào) | BS6001 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 糖原合成酶試劑盒 |
糖原合成酶(Glycogen synthase,GCS)試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:
GCS(EC 2.4.1.11)催化 UDPG 和葡萄糖殘基生成糖原和 UTP,以α-1,4-糖苷鍵相連延長(zhǎng)糖鏈,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰島素作用的主要靶酶,對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。
測(cè)定原理:
GCS 催化UDPG 和葡萄糖殘基生成糖原和UDP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化 NADH 氧化生成NAD+,在 340nm 下測(cè)定NADH 下降速率,即可反映 GCS 活性。
糖原合成酶試劑盒 糖原系列-常備現(xiàn)貨
組成:
產(chǎn)品名稱 | BS6001-50T/48S | Storage |
提取液:液體 | 60ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 45ml | 4℃ |
試劑二:液體 | 5ml | 4℃ |
試劑三:液體 | 41μl | 4℃ |
試劑四:粉劑 | 1 支 | -20℃ |
試劑五:粉劑 | 1 瓶 | -20℃ |
說(shuō)明書(shū) | 一份 |
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
樣本的前處理:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、工作液的配制:臨用前將試劑三和試劑四轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
3、試劑五的配制:臨用前在試劑五瓶中加入 2.5ml 試劑二充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
4、將工作液和試劑五置于 37℃預(yù)熱 5 分鐘。
5、在 1ml 石英比色皿中加入 50μl 樣本、50μl 試劑五和 900μl 工作液,立即混勻,記錄 340nm 處初始吸光值A1 和 1min 后的吸光值A2,計(jì)算ΔA=A1-A2。
注意:在該試劑盒中,若ΔA 大于 0.1,需將樣本用提取液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后測(cè)定,使ΔA 小于 0.1 可提高檢測(cè)靈敏度。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
GCS 活性計(jì)算:
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義:每mg 組織蛋白每分鐘消耗 1nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。
GCS(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=3215×ΔA÷Cpr
(2) 按樣本鮮重計(jì)算
單位定義:每g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。
GCS(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總)÷T=3215×ΔA÷W
V 反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm; V 樣:加入樣本體積,0.05 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時(shí)間,1 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g。