1.維生素VB6檢測試劑盒

是從樣品稀釋提取所獲得的。將經(jīng)過稀釋的提取物和維生素VB6檢測培養(yǎng)基加入包被有釀酒酵母 （Saccharomyces cerevisiae）ATCC9080的微孔中。釀酒酵母的生長狀況取決于維生素VB6的含量。在維生素VB6測試培養(yǎng) 基中，添加維生素VB6標(biāo)準(zhǔn)品或含維生素VB6的樣品提取液，釀酒酵母會一直生長直至維生素VB6被消耗掉。孵育條件應(yīng) 為黑暗、30 °C條件下孵育16 - 24小時，然后通過酶標(biāo)儀在610 - 630 nm （或者540 - 550 nm）讀取結(jié)果，根據(jù)維生素VB6標(biāo)準(zhǔn)品濃度和相應(yīng)的酵母菌OD值繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算出樣品中維生素VB6含量。

2.維生素 VB6檢測試劑盒 樣品處理

2.1 樣品提取液配制： 濃縮樣品提取液使用前需充分混勻（如有結(jié)晶析出，可適當(dāng)加熱溶解，溫度不超過60℃），稀釋20倍后備用。如： 50 mL濃縮液 + 950 mL超純水充分溶解。

2.2 含強化維生素VB6 的嬰兒食品，飲料或維生素預(yù)混料等樣品 稱量 1 g（mL）均質(zhì)樣品至一個 50 mL 無菌離心管中，準(zhǔn)確加入 40 mL 稀釋后樣品提取液，搖勻，確保樣品全部溶解 、無結(jié)塊。在 95 – 99 °C 水浴中溫育 30 min（加熱后注意蓋子是否松動，冷卻前應(yīng)擰緊）。使用冰水或流動水流 迅速冷卻至 30 °C 以下。然后 8000 g 離心 5 min（若樣品經(jīng)離心后分層不明顯或上層較分散，建議再次離心 5 min）， 離心后，使用 0.22 μm 濾膜過濾脂肪層下的樣品溶液備用。以上步驟樣品稀釋 40 倍，根據(jù)濃度范圍，確定是否在 1.5 mL （或 2.0 mL）無菌試管中進(jìn)一步稀釋過濾后的樣品溶液。

根據(jù)產(chǎn)品上的標(biāo)識濃度計算相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。未知樣品首先估算起濃度范圍，可選擇性進(jìn)行多種稀釋倍數(shù)的樣品 上清液進(jìn)行分析。樣品上清液需避光保存，并盡可能在當(dāng)天使用。

 3.樣品提取時需要 1 g（mL）均質(zhì)樣品溶解于 40 mL 樣品提取液中。這相當(dāng)于樣品的提取稀釋倍數(shù)為 40。

樣品上清液的稀釋倍數(shù)計算示例（上清液稀釋后的濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線中間區(qū)域）： 固體樣品，標(biāo)注的活性維生素VB6濃度為4920ng / mL （由生產(chǎn)商在標(biāo)簽上標(biāo)注） 計算：4920 ÷ 0.8= 6150，前處理已進(jìn)行40倍稀釋，故6150÷ 40= 153.75（注：當(dāng)考慮實際樣本中含量會高于標(biāo)識值，建 議適當(dāng)放大稀釋倍數(shù)，如160倍，200倍） → 稀釋倍數(shù) 160（1:160稀釋） 稀釋步驟： ? 1 : 10 → 0.1 mL樣品濾液 + 0.9 mL無菌水 ? 1 : 8→ 0.1 mL上述稀釋液 + 0.7 mL無菌水 ? 1 :2→ 0.2 mL上述稀釋液 + 0.2 mL無菌水 注：稀釋過程必須充分混勻，吸取溶液應(yīng)充分混勻。對樣品液進(jìn)行稀釋時建議逐級稀釋，每次稀釋不應(yīng)大于 10 倍。