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免疫組化檢測

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IHC免疫組化檢測

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 上海博谷生物科技有限公司是由歸國留學人員創(chuàng)辦的生物科技公司,創(chuàng)立于本世紀初,至今已有十余年的歷史,研發(fā)總部設在美國Research Park,University of California Davis。公司集技術服務、產品開發(fā)、項目合作和試劑耗材開發(fā)和銷售于一體。

主要從事生物、醫(yī)藥、農業(yè)等生命科學領域的分子生物學、免疫學等科研項目的技術服務、實驗委托與設計、技術咨詢等,公司自主研發(fā)的多種ELISA試劑盒享有較高的聲譽,細胞庫近千種細胞株為客戶提供服務;為客戶代理銷售R&D、Sigma、Amresco 、Omega、Gibco、Pharmacia、HyClone、GIBCO等多個歐美知名品牌公司試劑。

科研試劑耗材,分子病理檢測服務

免疫組化檢測實驗步驟:

1.包埋好的標本用石蠟切片機切片3um

2.經60℃烘片1小時

3.二甲苯Ⅰ脫蠟10分鐘

4.二甲苯Ⅱ脫蠟10分鐘

5.梯度酒精復水:100%酒精5分鐘,100%酒精5分鐘,95%酒精5分鐘,80%酒精5分鐘,自來水沖洗 5分鐘

6.進行抗原修復:將切片置于0.1mol/L且ph=6.0的枸櫞酸液修復液中,沸水浴20分鐘,停止加熱后自然冷卻20-30分鐘

7.用PBS 3分鐘3次,組畫筆畫圈,滴加雙氧水,孵育20min

8.用PBS 3分鐘3次,滴加封閉血清封閉1h

9.甩干,滴加適宜濃度的一抗置濕盒中4℃孵育過夜

10.用PBS 3分鐘×5次洗去一抗

11.甩干,滴加二抗室溫置孵育盒中孵育1小時(注意二抗種屬,夏季30min,冬季1h)

12.用PBS 3分鐘×5次洗去二抗

13.甩干,滴加DAB 顯色,水沖

14.蘇木素染核5min (新配置的蘇木素視情況而定)

15.流水沖洗多余的蘇木素,分化液中分化1秒

16.流水沖洗5min

17.梯度酒精復水:80%酒精5分鐘,95%酒精5分鐘,100%酒精5分鐘,100%酒精5分鐘,二甲苯Ⅱ透明5min,二甲苯Ⅰ透明5min(如為全透明,可適當延長時間)

18.用中性樹膠封片

19.鏡檢


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