猴腫瘤壞死因子β（TNF-β）elisa試劑盒

目的:探究柿桃提取物對(duì)L-NAME(NG-硝基-左旋精氨酸甲酯鹽酸鹽)誘導(dǎo)的高血壓SD大鼠的降壓作用及可能的降壓機(jī)制. 方法:(1)制備柿子葉水提物,酸楊桃果汁濃縮,把兩者按比例混合,通過十二指腸給藥于正常的SD大鼠,使用BL-420S系統(tǒng)檢測給藥前及給藥后四小時(shí)內(nèi)SD大鼠的頸動(dòng)脈壓.(2)借助L-NAME試劑來建立高血壓大鼠模型,灌胃給藥.一批鼠采用十二指腸給藥途徑,借助頸總動(dòng)脈插管法與BL系統(tǒng)相連,進(jìn)而對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥前,給藥后4h內(nèi)的SBP(收縮壓),DBP(舒張壓)以及MBP(平均動(dòng)脈壓)進(jìn)行測定.另一批鼠則采取連續(xù)4周灌胃給藥干預(yù),當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清醒狀態(tài)下,通過*血壓測量系統(tǒng)來對(duì)尾動(dòng)脈壓進(jìn)行測量.(3)后一次給藥完成,通過水合氯醛對(duì)大鼠實(shí)施麻醉處理,并取血,然后進(jìn)行血清分離操作,分別借助硝酸還原酶法,羥胺法,TBA(硫代*酸)法以及比色法分別對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清中的一氧化氮(NO),T-SOD(總超氧化物歧化酶),MDA(丙二醛),T-AOC(總抗氧化能力)進(jìn)行檢測,同時(shí)借助ELISA試劑盒對(duì)含NE(去甲腎上腺素),ET-1(內(nèi)皮素1),Ang-Ⅱ(血管緊張素Ⅱ)的量實(shí)施檢測.

目的: 研究腫瘤壞死因子-β(TNF-β)對(duì)重型再生障礙性貧血(SAA)患者效應(yīng)T細(xì)胞(CD8+HLA-DR+T細(xì)胞)損傷骨髓造血的影響,探討TNF-β在SAA免疫發(fā)病中的作用及CD8+HLA-DR+T細(xì)胞在SAA免疫發(fā)病中的地位. 方法: 部分以免疫磁珠陽性分選15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+T細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞,以陰性分選去除15名正常人骨髓單個(gè)核細(xì)胞中CD3+T細(xì)胞后作為靶細(xì)胞,兩者混合培養(yǎng),于體系中分別加入不同濃度TNF-β(終濃度分別為15ng/ml,25ng/ml,50ng/ml)為實(shí)驗(yàn)組,并設(shè)空白對(duì)照組,孵育72h后,通過流式細(xì)胞術(shù)以AnnexinV檢測靶細(xì)胞凋亡狀況,采用ELISA法測定培養(yǎng)上清液IL-10,IFN-γ水平. 第二部分以免疫磁珠(MACS)分選15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+T細(xì)胞,分為三組:白介素-2(IL-2)組(終濃度分別為0U/L,0.1U/L,1U/L,10U/L,100U/L,1000U/L);CsA組(在IL-2濃度基礎(chǔ)上每孔均加入終濃度為400ng/ml的CsA);受體拮抗劑組(在IL-2濃度基礎(chǔ)上每孔均加入終濃度為8ug/mlIL-2受體拮抗劑),孵育72h后MTT法檢測細(xì)胞增殖率.Ficoil法分離SAA患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞,分為CsA組,IL-2組,對(duì)照組(不加任何刺激因素),孵育18h后加入佛波酯(PMA)等活化4h,流式細(xì)胞儀檢測CD8+HLA-DR+T細(xì)胞胞內(nèi)TNF-β蛋白表達(dá)水平. 猴腫瘤壞死因子β（TNF-β）elisa試劑盒