A004-96T 羥基自由基清除能力測試試劑盒上海惠誠現(xiàn)貨
- 公司名稱 上海惠誠生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) A004-96T
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/6/11 16:57:19
- 訪問次數(shù) 473
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上海惠誠生物科技有限公司，成立于2010年，企業(yè)宗旨“惠質(zhì)產(chǎn)品，摯誠服務(wù)”。惠誠生物自成立以來，一直致力于為客戶提供一站式科學(xué)服務(wù)，產(chǎn)品覆蓋設(shè)計(jì)開發(fā)全過程，提供實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、儀器設(shè)備、耗材、試劑、技術(shù)服務(wù)等專項(xiàng)配套服務(wù)。上?；菡\生物按照客戶的研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制環(huán)節(jié)整合各種優(yōu)質(zhì)資源，優(yōu)化資源組合，為客戶提供整體解決方案。
上海惠誠生物在上海建立研發(fā)中心，在湖北和江蘇有生產(chǎn)基地，在廣州和深圳建立子公司，立足上海，銷售網(wǎng)絡(luò)遍布全國，為客戶提供綜合服務(wù)。
“不忘初心，砥礪前行”。 上?；菡\生物經(jīng)過多年不懈努力，目前產(chǎn)品線包括：生命科學(xué)，分析化學(xué)，生化試劑和儀器耗材?？蛻舯椴迹荷镝t(yī)藥，體外診斷，食品行業(yè)，石油化工，科研院校和研究所等領(lǐng)域。
特色產(chǎn)品：
生命科學(xué)：Crispr系列產(chǎn)品，組織因子，電泳預(yù)制膠，熒光染料，核酸探針，大包裝新冠抗原抗體，工業(yè)用酶
分析化學(xué)：糖化學(xué)研究，脂類分析，植物分析，聚合物分析，醫(yī)藥分析，試劑盒
生化試劑：PEG衍生物，多肽，大包裝膠體金輔料，大包裝生物醫(yī)藥輔料，通用生化試劑
儀器耗材：生物上游工藝，生物下游工藝，細(xì)胞治療，微生物監(jiān)測，理化分析，公用系統(tǒng)。
品牌服務(wù)：
生命科學(xué)：
Abcam、AdooQ、ALPCO、Biolegend、Cytiva、Cayman、Dojindo、Immunostar、Invitrogen、Jackson、美天旎Miltenyi、Novoprotein近岸、Prozyme、R&D、SinoBiological義翹、Stratagene、SYSY、Thermo Fisher、Wako、Topoen
分析化學(xué)：
AOCS、Carotenature、CIL、DR、Elicityl、EP、Glycarbo、Larodan、Matreya、Megazyme、Nu-Chek、Olchemim、Phytolab、QCC、Reagecon、TLC、TRC、USP
生化試劑：
Aladdin阿拉丁、Avanti、Broadpharm、Focus、Laysan、LKT、Macklin麥克林、Sigma、TCI、Thermo Fisher、vivitide
儀器耗材：
湘儀、精騏、Corning、Eppordorf、浙江孚夏、力康、海爾、匯松、赫西、Mettler Toledo、Millipore、NEST、松下、Pall、Rainin瑞寧、Whatman、上海一恒
主要代理品牌以及產(chǎn)品
糖類標(biāo)準(zhǔn)品,脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品,花青素標(biāo)準(zhǔn)品,類胡蘿卜素,人乳寡糖等食品分析標(biāo)準(zhǔn)品
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | A004-96T |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
羥基自由基清除能力測試試劑盒上?；菡\現(xiàn)貨供應(yīng)
（A004-96T）
一、 測定原理
金屬離子與過氧化氫通過芬頓反應(yīng)生成的羥基自由基（•OH），•OH攻擊脫氧核糖并破壞其環(huán)呋喃環(huán)生成丙二醛（MDA）。丙二醛與2-硫代巴比(空格)妥酸（TBA）結(jié)合后在532nm處具有大吸收峰（Halliwell等，1987，ANAL BIOCHEM）。具體反應(yīng)如下：
Fe3+-EDTA + 抗壞血酸 → Fe2+-EDTA +氧化的抗壞血酸 (1)
Fe2+-EDTA + H2O2 → OH- + •OH + Fe3+-EDTA (2)
•OH + 脫氧核糖 → 脫氧核糖碎片 MDA (3)
MDA + 2TBA → 發(fā)色體(4)
專一的羥基自由基抗氧化劑能減少羥基對脫氧核糖的攻擊，從而減少MDA產(chǎn)生而使發(fā)色體減少。通過測定反應(yīng)終產(chǎn)物的吸光值即可判斷受測樣品的羥基自由基清除能力。
二、 試劑組成
試劑一：液體，2mL；
試劑二：液體，2mL；
試劑三：液體，2mL；
試劑四：液體，2mL；
試劑五A：液體，100mL；
試劑五B：淡黃色粉末；
試劑六：液體，100mL；
標(biāo)準(zhǔn)品：體系終濃度為10mM的甘露(空格)醇（雙蒸水配制），10mL。
三、 儲(chǔ)存條件及有效期
試劑盒-20℃可保存6個(gè)月。
四、 試劑的配制
試劑一應(yīng)用液：待試劑融化后，在試劑一瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑二應(yīng)用液：待試劑融化后，在試劑二瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑三應(yīng)用液：待試劑融化后，在試劑三瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑四應(yīng)用液：待試劑融化后，在試劑四瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑五應(yīng)用液：待試劑五A融化后，將試劑五B全部倒入試劑五A中，充分搖勻溶解（若發(fā)現(xiàn)不好溶解，可超聲波助溶或適當(dāng)加熱。如不易觀察是否全部溶解，可將試劑五A倒入燒杯中，配制好后再倒回試劑五A瓶內(nèi)，避光保存）；
試劑六：直接使用；
標(biāo)準(zhǔn)液：根據(jù)實(shí)際需要，采用雙蒸水稀釋使用。
所有試劑均需現(xiàn)配現(xiàn)用！
五、 操作步驟
樣品對照孔1 | 樣品測定孔 | 空白孔 | |
樣品溶液（μL） | 200 | 200 | |
雙蒸水（μL） | 200 | 200 | |
試劑一應(yīng)用液（μL） | 200 | 200 | |
試劑二應(yīng)用液（μL） | 200 | 200 | 200 |
試劑三應(yīng)用液（μL） | 200 | 200 | 200 |
試劑四應(yīng)用液（μL） | 200 | 200 | 200 |
充分混勻，37℃水浴30min使之充分反應(yīng)。
樣品對照孔 | 樣品測定孔 | 空白孔 | |
試劑六（μL） | 1000 | 1000 | 1000 |
試劑五應(yīng)用液（μL） | 1000 | 1000 | 1000 |
充分混勻，100℃沸水浴15min2。
冷卻后進(jìn)行比色讀數(shù)。如您具有可以測定532nm處吸光值的酶標(biāo)儀，可從反應(yīng)液中取出200μL于酶標(biāo)板內(nèi)采用酶標(biāo)儀讀數(shù)；或者您也可以采用分光光度計(jì)測定532nm處吸光值。
1如樣品顏色較淺可不做樣品空白（即認(rèn)為值為0）；
2建議反應(yīng)15min，也可適當(dāng)延長或縮短時(shí)間至10-20min，但同一批樣品加熱時(shí)間需保持一致。
六、計(jì)算公式
注： 如未做對照孔，可以將其視作為0；
七、注意事項(xiàng)
1. 如樣品中色素物質(zhì)不是分析對象，建議先進(jìn)行脫色處理，處理后樣品可不做對照孔；
2. 如不確定樣品的羥基自由基清除能力，可先做不同濃度的稀釋液進(jìn)行摸索，并選擇適宜濃度進(jìn)行測定，高濃度下，濃度與清除率間并不線性相關(guān)。注意，產(chǎn)物的不同自由基清除能力可能相差很大，可能一個(gè)化合物的超氧陰離子自由基清除能力特別好，IC50可以低于10μg/mL，但羥基自由基清除能力很差，IC50達(dá)到10mg/mL，或者根本沒有清除能力；
3. 混勻很重要，建議每加一種試劑時(shí)均充分混勻。
4. 100℃沸水浴可采用水浴鍋或者電磁爐進(jìn)行加熱。加熱時(shí)可用錫紙蓋住試管管口，并用牙簽戳一個(gè)小孔。若使用一次性離心管進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，切記不可將上蓋蓋死，氣體膨脹有爆裂危險(xiǎn)！
5. 加樣順序不可顛倒！不可將試劑一至四混勻后加入樣品；
6. 本測試盒部分試劑對皮膚有一定傷害，請戴手套操作。在沸水浴時(shí)小心蒸汽燙傷；
7. 煮沸加熱時(shí)間和溫度對本測試至關(guān)重要，請務(wù)必保證所有測試管加熱時(shí)間和溫度均相同。同時(shí)請務(wù)必等待樣品冷卻到室溫時(shí)再進(jìn)行讀數(shù)測定，如需快速冷卻，可采用自來水沖洗試管外壁的方法；
8. 測定羥基自由基的方法總類繁多（Halliwell等，1988，Methods of Biochemical Analysis），同一樣品采用不同方法測定時(shí)會(huì)有一定差異，因此不同方法測定的結(jié)果不能簡單比較；
9. 本測試樣品一般不可采用有機(jī)溶劑溶解！極少量也不可以！常見的有機(jī)溶劑如乙醇等，其通過本方法得到的羥基自由基清除率*，超過許多常見抗氧化劑，不可以忽略。不可使用的有機(jī)溶劑及機(jī)理參見文獻(xiàn)：Xican Li, 2013, Food Chemistry.
羥基自由基清除能力測試試劑盒上?；菡\現(xiàn)貨供應(yīng)
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