DNA合成氨氣氨解儀是為有效制備生物樣品而設(shè)計(jì)的，用于PCR引物、探針和組分生產(chǎn)，DNA測(cè)序、DNA和RNA合成、隨機(jī)啟動(dòng)、載體設(shè)計(jì)、DNA指紋和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脫保護(hù)基快捷高效穩(wěn)定的解決方案。

DNA合成氨氣氨解儀特點(diǎn)：

反應(yīng)器容量：10升容量

樣品數(shù)量：6至10個(gè)，每個(gè)樣品有96位。

溫度范圍:*200°C

功率輸出：1200瓦

符合CE標(biāo)志

保修12個(gè)月

電源：220 V至240 V/50/60 Hz

*功耗：2500瓦

顯示屏：彩色觸摸屏

尺寸:W x D x H 52 x 73 x 123厘米（無(wú)終端）

重量：180公斤

采用Oligo高壓微波氨解儀，一次性可以氨解960個(gè)樣品并直接得到干燥的樣品，氨解時(shí)間也大大縮短。

傳統(tǒng)的氨解步驟如下，費(fèi)時(shí)費(fèi)力：

一．     氨解前的準(zhǔn)備

1. 檢查純化所需材料及試劑是否充足。、

2. 活化C18板（柱） 向C18板加滿0.5M NaCl，抽干，重復(fù)平衡3次，再加滿分析純，抽干5次以上，后以洗脫速度離心。洗脫后再向C18板內(nèi)加滿0.5M NaCl，抽干，重復(fù)3次，完畢再向C18板內(nèi)加滿0.5M NaCl以待用。C18柱活化，首先用20ml分析純活化C18一次，吹干甲醇，然后用10ml NaCl平衡1次以待用。

3.制板灌膠 計(jì)算好預(yù)用分析板及電泳板數(shù)量以灌膠。膠液制作，每塊板需50ml左右的16%的膠（短鏈，16%；長(zhǎng)鏈，12%），每塊板平均加入過硫酸銨100ul，TEMED 30ul(依情況而定，可適量增減)，搖晃，混勻，倒入板中，水平放置，使膠凝固。注意板中不能有氣泡，并注意補(bǔ)膠。

注意事項(xiàng)：①所用C18板需定期進(jìn)行維護(hù)與檢測(cè)。

②每一瓶新制膠使用之前需對(duì)膠跑Marker以保能正常使用。

二．     氨解

原理：切割—將合成好的寡核苷酸鏈從支持物上化學(xué)切割下來(lái)。用冰氨水來(lái)裂解CPG

連接化合物與初始核苷間的酯鍵。斷裂下來(lái)的寡核苷酸帶有自由的3‘羥基。

   脫保護(hù)基—用冰氨水處理較長(zhǎng)時(shí)間以脫掉堿基環(huán)上的氰乙基、苯甲酰基、異丙基等保護(hù)基團(tuán)。

1.    單管氨解

①    將合成好的柱子用注射器針頭將CPG或樹脂粉末全部倒入氨解瓶中，并將對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽貼在氨解瓶上。

②    加入冰三乙胺100ul，冰氨水1.5ml，蓋緊瓶蓋，放入80度烘箱氨解2小時(shí)。對(duì)用快速氨解單體合成的序列直接加氨水后55度2小時(shí)即可。在生產(chǎn)操作表上準(zhǔn)確記錄開始氨解的時(shí)間。

注意事項(xiàng):①在將引物放入氨解瓶時(shí),要核對(duì)清楚標(biāo)簽,要一一對(duì)應(yīng)。

         ②三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象)

        ③氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。
2.      96孔板氨解

①55度氨解

對(duì)好標(biāo)簽，向合成板內(nèi)加入適量的乙氰放在墊板上，重量平衡，高速離心。（對(duì)于3900，離心完后需用注射器針頭將砂芯勾出）離心完后，將墊板換成正面貼有對(duì)應(yīng)輪次標(biāo)簽的氨解板上。放入通風(fēng)櫥。先向合成板每孔加入50ul三乙胺，再向每孔加入250ul氨水，用膠帶封好放入氨解盒中，在操作單上登記好時(shí)間和氨解人，放入55度烘箱氨解40min。 

②80度氨解

40min后取出，放入通風(fēng)櫥趕氨1min，高速離心。拿去合成板用20ul小槍取小樣20ul；在向氨解板每孔內(nèi)加入冰氨水200ul，封好膠帶，用夾板夾好，登記好時(shí)間，放入80度烘箱氨解2h。

注意事項(xiàng):①務(wù)必在氨解板正面貼上該輪次標(biāo)簽,然后再位置一一對(duì)應(yīng)墊再合成板下面,一起氨解,離心。

         ②三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象)

        ③氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。

        ④夾板密封時(shí)要注意擰緊,防止出現(xiàn)漏氨。