培養(yǎng)條件

• 培養(yǎng)基：DMEM/F12+1%N2+2%B27
• 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
• 溫度：37攝氏度

細胞描述 

細胞描述：本公司培養(yǎng)出品的神經(jīng)干細胞（NPC）取自12天EGFP綠色熒光蛋白標記C57小鼠胚胎的端腦，用DMEM/F12+1%N2+2%B27*培養(yǎng)基進行原代培養(yǎng)和傳代。
細胞規(guī)格：10⁶/管
細胞活力：＞90%
細胞代數(shù)：原代
細胞運輸：干冰運輸（凍存管）/ 常溫運輸（T-25培養(yǎng)瓶）

細胞復蘇

1. 取出凍存管后，立刻放入37℃水浴中，輕輕晃動至*融化。
2. 用70%酒精消毒凍存管壁外側(cè)后，轉(zhuǎn)入生物安全柜或者超凈臺中，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至離心管中，慢慢加入9 ml 37℃預熱的DMEM/F12+10%FBS培養(yǎng)基。
3. 1000rpm離心5 min。
4. 去掉上清，再加入5ml DMEM/F12+1%N2+2%B27*培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

細胞傳代

1. 顯微鏡下觀察，神經(jīng)干細胞懸浮成“神經(jīng)球”生長，通常情況下，每兩天換液一次，每四天傳代一次。
2. 在生物安全柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的含有神經(jīng)球的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到15ml離心管中。
3. 500rpm離心5min，收集神經(jīng)干細胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在生物安全柜或者超凈臺中輕輕吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是縮小神經(jīng)球的體積，不要消化成單個神經(jīng)干細胞，那樣會影響其生長速度。
5. 然后加入5ml DMEM/F12+1%N2+2%B27培養(yǎng)基，吹打均勻后1000rpm 離心5min。
6. 離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，按照1:2-1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。

細胞凍存：本品使用DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO凍存液。

細胞圖片：100x熒光顯微鏡照片（綠色：細胞持續(xù)表達EGFP）

詳情可聯(lián)絡(luò)；: