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產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱

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78pei40000-78PEI MAX 40K轉(zhuǎn)染試劑

2025-07-03

產(chǎn)      地:
中國(guó)
所在地區(qū):
上海上海市
有效期還剩 344舉報(bào)該信息

78PEI MAX 40K轉(zhuǎn)染試劑 說(shuō)明書(shū)

??產(chǎn)品概述

化學(xué)名:線性聚乙烯亞胺,線性PEI,聚乙烯亞胺,線性,MW 40000,轉(zhuǎn)染級(jí)、線性聚乙烯亞胺(分子量40000

訂貨號(hào): 78pei40000

規(guī)格:100mg/500mg/5g

品牌:BIOHUB

CAS:49553-93-7

分子量:40,000(~22,000自由基)

溶于:水          

不溶于:常用有機(jī)溶劑(乙醇,丙酮,四氫呋口南)

外觀:白色至灰白色自由流動(dòng)的固體

處理:手套和通風(fēng)櫥

儲(chǔ)存:在室溫下避光干燥儲(chǔ)存

介紹:

1.78PEI MAX 40K轉(zhuǎn)染試劑(在游離堿中也稱為PEI 22K)是一種功能強(qiáng)大,值得信賴且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO大多數(shù)表達(dá)系統(tǒng)中,PEI MAX都能提供穩(wěn)定的高表達(dá)(96孔板至100L生物反應(yīng)器)?,F(xiàn)在每年有更多的研究人員和公司來(lái)使用PEI MAX進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,因?yàn)橄鄬?duì)于大多數(shù)轉(zhuǎn)染試劑而言 PEI MAX既能等到穩(wěn)定的高表達(dá)又能使轉(zhuǎn)染成本降低少40%。

2.78PEI MAX 40K比更PEI 25K易于使用,并且比PEI 25K有更高的轉(zhuǎn)染效率,通常PEI 25K轉(zhuǎn)染過(guò)程通常需要幾個(gè)小時(shí)才能完成準(zhǔn)備,而PEI MAX 40K可在兩小時(shí)內(nèi)完成整個(gè)轉(zhuǎn)染過(guò)程。另外,PEI 25K含有4-11%的殘留丙?;?,這可能阻礙聚合物主鏈與DNA的有效結(jié)合,而PEI MAX 40K的丙?;酌撀洌馕吨鳳EI MAX每批產(chǎn)品的性能更加穩(wěn)定。


??產(chǎn)品配置方法

1. 儲(chǔ)存液配制(1 mg/mL)  

-材料:78PEI40000粉末、超純水、1N NaOH、0.1 μm濾膜  

-步驟:  

 ① 取1g粉末溶于900 mL超純水,磁力攪拌至溶解;  

 ② 滴加1N NaOH調(diào)節(jié)pH至6.9-7.1(若超限則用1N HCl回調(diào));  

 ③ 定容至1L,0.1 μm濾膜過(guò)濾除菌;  

 ④ 分裝后4℃保存,液體有效期6個(gè)月,凍干粉有效期1年。  

2. 工作液配制  

- 按1 μg DNA : 1-5 μL 78PEI40000儲(chǔ)存液的比例稀釋(推薦初始比例1:3);  

- 使用無(wú)血清培養(yǎng)基(如Opti-MEM)稀釋DNA和PEI,室溫靜置10-25分鐘形成復(fù)合物。

 

??轉(zhuǎn)染操作流程

(一)貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染  

1.細(xì)胞接種:轉(zhuǎn)染前24小時(shí)接種細(xì)胞,密度達(dá)70%-80%匯合度,更換為含5%血清的培養(yǎng)基;  

2.復(fù)合物孵育:將DNA-PEI復(fù)合物逐滴加入培養(yǎng)皿,輕柔渦旋后孵育4-6小時(shí);  

3.換液與檢測(cè):更換新鮮培養(yǎng)基,7小時(shí)后可檢測(cè)基因表達(dá),24小時(shí)后傳代并添加篩選藥物。  

(二)懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染  

1.細(xì)胞準(zhǔn)備:調(diào)整細(xì)胞密度至1×10? cells/mL,搖床培養(yǎng)2-4小時(shí);  

2.復(fù)合物添加:將DNA-PEI復(fù)合物直接滴加至搖瓶,持續(xù)振蕩培養(yǎng)24-72小時(shí);  

3.擴(kuò)增優(yōu)化:轉(zhuǎn)染24小時(shí)后可稀釋細(xì)胞(1:2-1:5)以提高蛋白產(chǎn)量。  


?關(guān)鍵注意事項(xiàng)  

1.溶解要求:  

  - 必須充分溶解,未溶解顆粒會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降;  

  - 建議使用NEST 5 mL/14 mL離心管處理大體積溶液。  

2.pH控制:  

  - 初始溶解時(shí)pH需精確調(diào)節(jié)至6.9-7.1,過(guò)高或過(guò)低均影響復(fù)合物形成。  

3.細(xì)胞狀態(tài):

  - 推薦使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,避免消化過(guò)度損傷細(xì)胞膜。  

4.毒性控制:  

  - 高密度細(xì)胞(>90%匯合度)需降低PEI用量(推薦比例1:1)。  


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貨號(hào)

品名

規(guī)格

78pei40000

線性聚乙烯亞胺 分子量40000

100mg

78pei40000

線性聚乙烯亞胺 分子量40000

1g

78pei40000

線性聚乙烯亞胺 分子量40000

5g






(注:本文內(nèi)容基于品牌公開(kāi)資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。)

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