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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
II型糖尿病模型簡(jiǎn)介2022/09/02
動(dòng)物:小鼠,SD大鼠(1)造模試劑:高脂飼料+STZ(鏈脲佐菌素)造模方法:小鼠喂食高脂飼料,4周后,禁食不禁水12h,腹腔注射1.1%的鏈脲佐菌素溶液110mg/kg2-3次,正常對(duì)照組注射等體積生理鹽水,2天后,禁食不禁水12h,尾部取血,測(cè)小鼠空腹血糖,選擇高于11.1mmol/L的小鼠作為II型糖尿病小鼠模型。(2)造模試劑:STZ(鏈脲佐菌素)造模方法:將一定量的鏈脲霉素(STZ)溶于0.05M檸檬酸緩沖溶液中(pH4.5),配成特定濃度的溶液。將鏈脲霉素溶液腹腔內(nèi)注射到SD大鼠中,S
輸卵管炎模型操作2022/08/26
常用動(dòng)物SD大鼠,雌性,8-10周齡造模方法金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌按1:1:2比例用無(wú)菌生理鹽水配成3×10^9/ml的混合液采用混合菌造模法,用10%水合氯醛溶液0.3ml/100g腹腔注射后,仰臥固定、剃毛、消毒、鋪布,行縱形切口,打開(kāi)腹腔,找到Y(jié)形子宮,分別在子宮角附近輸卵管處注射細(xì)菌混懸液0.05ml,緩慢注射,每側(cè)注射混合菌液0.05mL,然后將輸卵管納回腹腔,用1號(hào)絲線先縫合腹壁再縫合皮膚,75%酒精消毒手術(shù)傷腸后輸卵管口,正常組不做任何處理。術(shù)后將大鼠側(cè)臥位放于
鼻炎模型操作2022/08/26
常用動(dòng)物6-8周齡BALB/C小鼠建模方法致敏:小鼠腹腔內(nèi)注射含500ug/mlOVA+20mg/ml氫氧化鋁的生理鹽水溶液,200ul/鼠。第1、8、15天重復(fù)注射一次,(共3次)。刺激:第22-29天,每天鼻腔滴入20ul40mg/mlOVA溶液(微量移液器),共8次。具體配置:1mlOVA致敏劑配制方法:取0.5mgOVA和20mg氫氧化鋁溶于1ml生理鹽水中攪拌混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。即為OVA(0.5mg/ml)+氫氧化鋁(20mg/ml)的生理鹽水溶液。OVA鼻腔激發(fā)劑:40mgOVA溶于1
高尿酸血癥模型2022/08/19
常用動(dòng)物C57/BL小鼠,雄性建模方法C57/BL6小鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,以含25%酵母膏飼料(酵母膏/飼料質(zhì)量比25%)喂食,聯(lián)合氧嗪酸鉀250mg/kg腹腔注射,每天一次,連續(xù)3周建立高尿酸血癥模型。對(duì)照組以普通飼料喂食,聯(lián)合等量生理鹽水腹腔注射,連續(xù)3周。確認(rèn)造模是否成功:眼球取血,檢測(cè)血清中尿酸濃度;尿酸腸道排泄測(cè)定小鼠造模結(jié)束后饑餓過(guò)夜,麻醉,用聚乙烯管分別在十二指腸上端和空腸中段插管構(gòu)成腸道環(huán)。腸道內(nèi)容物用生理鹽水和空氣緩慢灌注去除,用含有0.3mM氧嗪酸鉀的生理鹽水緩沖液每15m
膿毒癥小腸損傷2022/08/19
常用動(dòng)物大鼠建模方法大鼠盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)。大鼠用注射液與速眠新Ⅱ注射液按體積比8:3混合,0.4ml/kg肌肉注射麻醉后。實(shí)施無(wú)菌手術(shù),沿腹正中線切口,暴露盲腸并結(jié)扎根部(避免結(jié)扎回腸及盲腸根部血管),用16號(hào)針貫通穿刺盲腸3次形成腸瘺,留置一條2cmx2mm的橡皮條引流防針孔閉合。將盲腸還納腹腔,逐層縫合腹壁切口。術(shù)畢立即皮下注射50ml/kg生理鹽水抗休克,自由飲水。大鼠盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)。大鼠用注射液與速眠新Ⅱ注射液按體積比8:3混合,0.4ml/kg肌肉注射麻醉后。實(shí)施無(wú)菌手術(shù)
哮喘模型簡(jiǎn)介2022/08/12
常用動(dòng)物小鼠哮喘建模方法致敏:小鼠尾靜脈注射含100ug/mlOVA(卵清蛋白)+5mg/ml氫氧化鋁(致敏佐劑)的PBS溶液,200ul/鼠。第1,15天重復(fù)注射一次(共2次)。刺激:第21、22、23天,將小鼠置入有機(jī)玻璃小室內(nèi)中,將含有5%OVA的PBS溶液超聲霧化形成氣溶膠,小鼠吸入OVA氣溶膠30分鐘(共3次)。吸煙建模方法前期制備同哮喘致敏階段(用生理鹽水代替OVA),生理鹽水霧化30min后將大鼠置于半封閉透明被動(dòng)吸煙箱,給予大鼠被動(dòng)吸煙1次,每次吸煙10支,大約1h,每周吸煙5d
脊髓損傷模型簡(jiǎn)介2022/08/12
常用動(dòng)物小鼠建模方法腹腔注射1.5%溶液(65mg/kg)進(jìn)行麻醉,四肢固定與手術(shù)臺(tái)上,松緊適中,手術(shù)過(guò)程中注意觀察四肢是否出現(xiàn)瘀血,注意按摩。此時(shí),可用大頭針刺激小鼠尾巴,如果小鼠的反應(yīng)不強(qiáng)烈,預(yù)示著可以開(kāi)始手術(shù)。首先剪除小鼠胸椎區(qū)域毛,而后均勻噴灑碘伏溶液兩倍備皮區(qū)域。在小鼠背部脊柱有一個(gè)明顯的凸起(T11),從該凸起區(qū)域剖開(kāi)皮膚2-3cm,逐步暴露筋膜、肌肉直到椎骨。在T9~T11水平緊貼棘突兩側(cè)將椎旁肌縱行鈍性分離.咬除T9~T11棘突,顯露并切除椎板,暴露脊髓。將脊髓在T10椎體水平由
潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型構(gòu)建2022/08/05
潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型構(gòu)建大鼠自購(gòu)回后保持其自由飲水、進(jìn)食,溫度23-25°C,動(dòng)物房12h-12h晝夜交替,適應(yīng)性喂養(yǎng)--周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。模型鼠以200g/L蜂蜜水自由飲用,隔日按大鼠體重灌服豬油(灌胃劑量15g,灌胃前先加熱融化),并與油脂隔日灌服白酒(灌胃劑量20ml),共灌服20d.第6天和第20天于大鼠的左、右側(cè)足跖、腹股溝及背部五點(diǎn)注射抗原乳化液1ml(含抗原8mg)。各組大鼠于第21天禁食36h,用7%水合氯醛(5mL)麻醉,用硅膠管輕緩插入8-10cm,正常對(duì)照組用生理鹽水2.5ml
急性胰腺炎建模2022/08/05
急性胰腺炎建模實(shí)驗(yàn)大鼠自購(gòu)回后保持其自由飲水、進(jìn)食,溫度23-25°C,動(dòng)物房12h-12h晝夜交替,適應(yīng)性喂養(yǎng)-周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)大鼠稱重,7%水合氯醛(5ml/kg)腹腔注射進(jìn)行麻醉,仰臥位固定大鼠,正中切口進(jìn)入腹腔;找到胃十二指腸交界處,響下找到膽胰管十二指腸開(kāi)口處;1ml注射器穿刺進(jìn)入十二指腸粘膜內(nèi)的膽胰管開(kāi)口并深入1cm;用兩枚動(dòng)脈夾臨時(shí)夾住膽胰管肝門(mén)部和穿刺針,以防注射脫氧膽酸鈉時(shí)液體流入肝臟和十二指腸;向膽胰管內(nèi)勻速注射1.5%脫氧膽酸鈉(用藥劑量1.0ml,注射速度0.2ml/m
曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)2022/07/22
曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹糠治鱿到y(tǒng)是觀察研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)精神變化、進(jìn)入開(kāi)闊環(huán)境后的各種行為,例如動(dòng)物對(duì)新開(kāi)闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動(dòng),在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)較少,但動(dòng)物的探究特性又促使其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)的動(dòng)機(jī),也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)步驟1.實(shí)驗(yàn)在安靜的環(huán)境下進(jìn)行;2.行為指標(biāo)測(cè)定采用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定動(dòng)物的自發(fā)活動(dòng)。抓住大鼠或小鼠尾根部三分之一處提起,輕輕放入曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱正中格,同時(shí)進(jìn)行攝像和計(jì)時(shí);3.觀察時(shí)間后停止攝像,觀察時(shí)間可根據(jù)實(shí)驗(yàn)擬定,一般為3~5min;4.記錄3-5min內(nèi)大
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)2022/07/22
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)morris水迷宮實(shí)驗(yàn)(Morriswatermazetes)t在空間學(xué)習(xí)記憶能力的研究中較為經(jīng)典,三十多年來(lái)一直被廣泛應(yīng)用,實(shí)驗(yàn)方法也不斷改進(jìn)創(chuàng)新,實(shí)驗(yàn)對(duì)象初為大鼠,后來(lái)擴(kuò)展到小鼠甚至人類(lèi)(虛擬迷宮)Morris在方法學(xué)的研究進(jìn)展(Morris水迷宮實(shí)驗(yàn))Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)眾多,國(guó)內(nèi)進(jìn)行較多的程序是適應(yīng)性訓(xùn)練、定位航行實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)。適應(yīng)性訓(xùn)練是在實(shí)驗(yàn)前一天,不放置平臺(tái),讓大小鼠在水迷宮中自由游泳120s,結(jié)束訓(xùn)練后將其放入溫暖干燥的籠子,以避免大小鼠的應(yīng)激反應(yīng)。
小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)2022/07/15
小動(dòng)物活體成像主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶(Luciferase)基因標(biāo)記細(xì)胞或DNA,而熒光技術(shù)則采用熒光報(bào)告基團(tuán)(GFP、RFP,Cyt及dyes等)進(jìn)行標(biāo)記。技術(shù)應(yīng)用(小鼠活體成像實(shí)驗(yàn))通過(guò)活體動(dòng)物體內(nèi)成像系統(tǒng),可以觀測(cè)到疾病或癌癥的發(fā)展進(jìn)程以及藥物治療所產(chǎn)生的反應(yīng),并可用于病毒學(xué)研究、構(gòu)建轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型、siRNA研究、干細(xì)胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究以及細(xì)胞體外檢測(cè)等領(lǐng)域。具體應(yīng)用如下:1.標(biāo)記細(xì)胞(1
激光共聚焦實(shí)驗(yàn)2022/07/15
激光掃描共聚焦顯微鏡(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM)是在熒光顯微鏡成像基礎(chǔ)上配置激光光源和掃描裝置,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦裝置,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,對(duì)觀察樣品進(jìn)行斷層掃描和成像,是一種高敏感度與高分辨率的顯微鏡在生命科學(xué)領(lǐng)域的組織、細(xì)胞和分子水平研究中的應(yīng)用十分廣泛,主要用于樣品熒光定量檢測(cè),共聚焦圖像分析,三維圖像重建、活細(xì)胞動(dòng)力學(xué)參數(shù)分析和細(xì)胞間通訊等方面研究激光掃描共聚焦顯微鏡通過(guò)對(duì)樣品X-Y軸的逐點(diǎn)掃描,形成二維圖像。如果在z軸
抑郁癥模型2022/07/08
動(dòng)物5周雌性Wistar大鼠100–120g。建模大鼠適應(yīng)環(huán)境2周后,開(kāi)始卵巢摘除術(shù)1.大鼠常規(guī)麻醉,固定。2.卵巢摘除術(shù):7周雌性Wistar大鼠(200-220g)于最末肋骨下,腋中線和距脊柱外側(cè)2cm交叉處剪除長(zhǎng)毛,常規(guī)消毒后,切開(kāi)皮膚和背肌,用眼科鑷夾卵巢,分離脂肪團(tuán),結(jié)扎血管,切除卵巢,縫合肌層和皮膚。3.術(shù)后回復(fù)2周。4.慢性不可預(yù)知性溫和刺激(CUMS):在11種壓力源中,每天使用兩種,持續(xù)6周。按隨機(jī)順序:連續(xù)通宵照明(12小時(shí)),間歇性照明(燈亮1小時(shí)和熄滅1小時(shí);3小時(shí)),成
煙草煙霧引起的大鼠慢性支氣管炎2022/07/08
SD大鼠,200±20g。建模大鼠適應(yīng)環(huán)境一周,然后分為四組,每組六只大鼠。對(duì)照組大鼠暴露于過(guò)濾空氣中。模型組大鼠暴露于不同濃度的煙草煙霧中,煙草煙霧的濃度分別為40%、60%和80%;煙草煙霧組大鼠全身暴露于煙草煙霧1小時(shí)/天,連續(xù)4周。模型驗(yàn)證計(jì)數(shù)支氣管肺泡灌洗液中巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,氣管(近端、遠(yuǎn)端、末端)和肺實(shí)質(zhì)的病理觀察等。SD大鼠,200±20g。建模大鼠適應(yīng)環(huán)境一周,然后分為四組,每組六只大鼠。對(duì)照組大鼠暴露于過(guò)濾空氣中。模型組大鼠暴露于不同濃度的煙草煙霧中,煙草煙霧的
LPS誘導(dǎo)的肺損傷模型2022/07/01
LPS誘導(dǎo)的肺損傷模型肺中性粒細(xì)胞增多癥在呼吸窘迫綜合征(ARDS),囊性纖維化(CF)和慢性阻塞性肺疾?。–OPD)等疾病中是一個(gè)統(tǒng)一存在的病理表現(xiàn)。據(jù)推測(cè),中性粒細(xì)胞的在肺部的聚集和活化導(dǎo)致肺功能障礙癥狀,包括氣道反應(yīng)增加,肺纖維化和粘液的過(guò)度分泌。脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分。當(dāng)進(jìn)入動(dòng)物肺部組織時(shí),LPS顯示多種肺部損傷的功能,包括肺組織中的白細(xì)胞積聚,肺水腫,嚴(yán)重的肺部炎癥和高致死率。LPS誘導(dǎo)的急性肺中損傷模型小鼠和大鼠模型的特征是肺中性粒細(xì)胞積聚和炎性介質(zhì)的產(chǎn)生。
高脂飲食誘導(dǎo)大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型2022/06/18
動(dòng)物SD大鼠,160–180g,6-7周。建模大鼠適應(yīng)環(huán)境一周后,8只SD大鼠(雄性:雌性=1:1)作為對(duì)照組并正常飲食;8只SD大鼠(雄性:雌性=1:1)用高脂食物喂養(yǎng),持續(xù)9周至建立動(dòng)脈粥樣硬化模型。高脂食物成分:基礎(chǔ)日糧81.3%、總膽固醇3%、豬油10%、蔗糖5%、丙基硫氧嘧啶0.2%和膽酸鈉0.5%。在高脂飲食的第一天動(dòng)脈粥樣硬化組給予維生素(600000IU/kg),正常組腹腔注射等同劑量生理鹽水溶液。在4和6周,向動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組補(bǔ)充劑量為100000IU/kg維生素,而對(duì)照組注
上海交通大學(xué)藥學(xué)院OVA誘導(dǎo)哮喘動(dòng)物模型介紹2022/06/09
基本介紹哮喘的發(fā)生發(fā)展與遺傳、免疫、環(huán)境和藥物作用等有關(guān),其誘發(fā)因素包括過(guò)敏原、病毒感染、刺激物、運(yùn)動(dòng)等。其病理特點(diǎn)為T(mén)h2淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)強(qiáng),IL-4、IL-5、IL-13增強(qiáng),導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)增多、粘液分泌增多、支氣管高反應(yīng)性(BHR)、免疫球蛋白E(IgE)合成和組織重塑。臨床表現(xiàn)為氣喘、胸悶、咳嗽等癥狀,多發(fā)生在夜間或凌晨,因此建立可靠的哮喘動(dòng)物模型對(duì)于探究哮喘的發(fā)病機(jī)制,發(fā)現(xiàn)藥物作用靶點(diǎn)具有重要意義。目前哮喘模型選取的動(dòng)物主要用BALB/c小鼠、C57小鼠、SD大鼠、Wistar大
腫瘤疾病動(dòng)物模型有哪幾類(lèi)?2022/06/03
1.自發(fā)性腫瘤(spontaneoustumor)動(dòng)物模型:指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置,在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。2.誘發(fā)性腫瘤(inducedtumor)動(dòng)物模型:是使用致癌因素在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤的動(dòng)物模型。3.移植性腫瘤(transplanttumor)動(dòng)物模型:指將動(dòng)物或人體腫瘤移植同種或異種動(dòng)物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。1.自發(fā)性腫瘤(spontaneoustumor)動(dòng)物模型:指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置,在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。2.誘發(fā)性腫
動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)2022/06/03
動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)主要是為了研究動(dòng)物界動(dòng)物的行為、溝通、情緒以及社交、學(xué)習(xí)、繁衍等一系列的行為過(guò)程的實(shí)驗(yàn)方法,本質(zhì)上是一種研究動(dòng)物對(duì)環(huán)境和其他生物的互動(dòng)等問(wèn)題的學(xué)科,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可以獲得的一些重要的動(dòng)物行為學(xué)研究數(shù)據(jù)。在現(xiàn)代,動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)是研究動(dòng)物行為的必然手段,在動(dòng)物行為發(fā)生當(dāng)時(shí)的原因以及機(jī)制、發(fā)育或發(fā)生的研究過(guò)程中具有十分重要的實(shí)踐意義??梢赃M(jìn)一步在分子水平上,對(duì)研究動(dòng)物行為對(duì)象的相應(yīng)基因的分離、克隆和轉(zhuǎn)移上,做一個(gè)更為深入的行為學(xué)研究。
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