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WB實驗過程中常見條帶問題分析解決方法2025/05/30

WB實驗過程中常見條帶問題分析解決方法一、除了目的蛋白條帶外有很多條雜帶1.一抗抗體差異，部分不常見的分子抗體是多克隆的，雜帶比較多。2.一抗4℃孵育過夜時，如果一抗的孵育濃度較高，也容易出現雜帶。一般可按抗體說明書來設定稀釋濃度。3.二抗孵育時間過長或者二抗?jié)舛冗^高也會導致雜帶增多。一般二抗規(guī)定的孵育時間為室溫1-2小時，一般1小時足矣，時間過長易出現非特異性條帶；二抗一般1：10000稀釋。4.一抗與二抗之間TBST洗膜時間較短，次數較少，常規(guī)應該洗三次，一次10min。5.在封閉，或是一抗

人原代膽囊成纖維細胞性能特點2025/05/28

人原代膽囊成纖維細胞HumanCholecystokinoblastsCells貨號：HUM-YJ-d025價格：7750.0規(guī)格：1*105細胞詳述膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構造，有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。其中，外膜層主要由成纖維細胞構成。細胞特性1)細胞來源于人正常膽囊組織。2)細胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性。3)經鑒定細胞純度高于90%。4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。5)細胞生長方式：

人原代肝Kupffer細胞性能特點2025/05/28

人原代肝Kupffer細胞HumanKupffercells貨號：HUM-YJ-d019價格：8650.0規(guī)格：1*105細胞詳述肝非實質細胞主要包括肝竇狀內皮細胞、淋巴細胞、Kupffer細胞和肝星狀細胞。肝Kupffer細胞指位于肝竇內表面的吞噬細胞，位于肝血竇腔內，具有變形運動和活躍的吞噬功能，還具有處理和傳遞抗原、調節(jié)機體免疫應答等作用，能夠清除血液中的外來抗原、抗原－抗體復合物和細胞碎片等物質。肝Kupffer細胞是全身單核-吞噬細胞系統(tǒng)的重要組成部分,也是肝臟防御系統(tǒng)主要成員,在全身

人原代肝竇內皮細胞性能特點2025/05/28

人原代肝竇內皮細胞HumanHepaticSinusoidalEndothelialCells貨號：HUM-YJ-d018價格：8650.0規(guī)格：1*105細胞詳述肝竇內皮細胞是肝臟非實質細胞中數目最多的細胞，約占肝非實質細胞總數的70%，在表型、功能上與普通毛細血管內皮細胞有較大差異。肝竇內皮細胞之間缺乏細胞間連接，細胞下基底膜物質很少，因此竇內皮通透性較高，有利于調節(jié)物質交換。不同于肝細胞的自我復制，肝再生時新生LSECs主要來自肝內外其他細胞成分的分化替代，不少研究證實了肝再生時LSECs

人原代肝星狀細胞性能特點2025/05/28

人原代肝星狀細胞HumanHepaticStellateCells貨號：HUM-YJ-d017價格：8650.0規(guī)格：1*105細胞詳述肝星狀細胞位于Disse間隙內，緊貼著肝竇內皮細胞和肝實質細胞。其形態(tài)不規(guī)則，胞體呈圓形或不規(guī)則形，常伸出數個星狀胞突包繞著肝血竇。正常情況下肝星狀細胞表現為富含維生素A脂滴的靜止型，其功能主要有：代謝和貯存維生素A、儲存脂肪、合成和分泌膠原及糖蛋白、蛋白多糖等基質成分、合成基質金屬蛋白酶及其組織抑制劑、表達細胞因子及受體、參與肝竇血流調節(jié)。肝星狀細胞是細胞外基

WB實驗注意細節(jié)2025/05/28

WB實驗注意細節(jié)1.細胞樣本，收細胞時，PBS預冷。2.組織樣本在取材時離體組織應盡快凍存，可以置于液氮中迅速冷凍，使用組織勻漿機進行勻漿時，一次研磨時間不宜過長，40s左右即可，如研磨不充分，可再次研磨。3.PMSF應注意搖勻至無結晶時方可使用。4.冰上裂解時，可以晃動以使裂解充分。5.裂解后的樣本盡量分裝保存，避免反復凍融，盡快變性使用。6.BCA定量時盡量不使用96孔板最邊緣一圈（由于有些儀器邊緣效應）。7.樣本可以根據具體情況稀釋合適的倍數再進行定量，以免超出標曲范圍。8.BCA定量時，

氨芐青霉素（Ampicillin）ELISA檢測試劑盒使用說明書2025/05/27

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷氨芐青霉素（Ampicillin）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被氨芐青霉素（Ampicillin）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的氨芐青霉素（Ampicillin）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計

人原代肝實質細胞性能特點2025/05/26

人原代肝實質細胞HumanHepaticParenchymaCells貨號：HUM-YJ-d016價格：7750.0規(guī)格：1*105細胞詳述肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用。肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟對來自體內和體外的許多非營養(yǎng)性物質如各種藥物、毒物以及體內某些代謝產物，具有生物轉化作用。通過新陳代謝將它們徹底分解或以原形排出體外。肝實質細胞是肝臟行使其功能的主要細胞,執(zhí)行著許

人原代肝外膽管上皮細胞性能特點2025/05/26

人原代肝外膽管上皮細胞HumanExtrahepaticBiliaryDuctEpithelialCells貨號：HUM-YJ-d015價格：7750.0規(guī)格：1*105細胞詳述膽管，輸送膽汁的管道。由肝分泌的膽汁，經肝左、右管、肝總管、膽囊管進入膽囊貯存，肝內膽管的部分包括：左、右肝管；左內葉、左外葉、右前葉、右后葉膽管；各肝段膽管；小葉間膽管；毛細膽管。常見的膽管病變如膽道閉塞、原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等，都是以膽管上皮為病變靶位，因此研究膽管上皮細胞的生物學特性和病理變化有重要意義。在這

人原代結腸成纖維細胞性能特點2025/05/26

人原代結腸成纖維細胞ColonFibroblastsCells貨號：HUM-YJ-d012價格：7190.0規(guī)格：1*105細胞詳述結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。在結腸腫瘤微環(huán)境中，成纖維細胞（NFs）與癌細胞相接處，轉化為癌相關成纖維細胞（CAFs），這些細胞在上皮腫瘤的惡性轉變中發(fā)揮著

人原代結腸平滑肌細胞性能特點2025/05/26

人原代結腸平滑肌細胞ColonSmoothMuscleCells貨號：HUM-YJ-d011價格：7060.0規(guī)格：1*105細胞詳述結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。結腸平滑肌細胞主要分布于粘膜肌層和肌層；結腸運動少而緩慢，對刺激的反應也較遲緩。細胞特性1)細胞來源于人正常結腸組織。2)細胞

蛋白提取相關知識介紹2025/05/26

蛋白提取相關知識介紹蛋白作為生命活動的基本功能單位，是經典的生物標志物，常用于蛋白質免疫印跡（WesternBlot，WB）、蛋白質免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）、染色質免疫沉淀（ChIP）、聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacrylamidegelelectrophoresis，PAGE）實驗等。為了實現我們的研究目的，需要將蛋白從細胞組織中提取分離出來，這一過程即為蛋白提取，提取出高質量的蛋白是后續(xù)

Western blot 實驗注意事項2025/05/23

Westernblot實驗注意事項1.配膠時，建議先加水，再加Tris-HCL緩沖液，并且每加一種液體就混勻膠液。加入的TEMED有毒，務必在通風櫥中操作，并且加入后立即混勻、灌膠。丙烯酰胺未聚合的單體有神經毒性，能夠經皮膚吸收，需戴手套操作。2.AP作為催化劑能夠提供氧自由基促使丙烯酰胺單體聚合，TEMED作為加速劑能夠促進AP釋放氧自由基，加速丙烯酰胺單體的聚合?？諝鉁囟容^低時稍稍多加TEMED可加快膠的凝固速度，但要確保AP未變質，否則無效。3.AP應現配現用，否則變質會導致膠不聚合。另外

人原代結腸粘膜上皮細胞產品介紹2025/05/23

人原代結腸粘膜上皮細胞ColonicMucosalEpithelialCells,結腸黏膜上皮細胞貨號：HUM-YJ-d010價格：7750.0規(guī)格：1*105細胞詳述結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。其中上皮細胞主要位于粘膜層的上皮層，為單層柱狀上皮,含較多的杯狀細胞。結腸粘膜內有杯狀細胞,

人原代小腸粘膜上皮細胞產品介紹2025/05/23

人原代小腸粘膜上皮細胞SmallIntestinalMucosalEpithelialCells,小腸黏膜上皮細胞貨號：HUM-YJ-d007價格：7750.0規(guī)格：1*105細胞詳述小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。一般根據形態(tài)和結構變化將小腸分為三段，分別為十二指腸，空腸和回腸。小腸壁結構一般分4層，由外向內依次為：漿膜層，平滑肌層，粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層：靠近粘膜下層的是一層平滑肌，稱為粘膜肌層。其次為結締組織，又稱為固有層。最

人原代胃成纖維細胞產品介紹2025/05/23

人原代胃成纖維細胞GastricFibroblastsCells貨號：HUM-YJ-d006價格：6950.0規(guī)格：1*105細胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經、血管和淋巴管的分布。其中成纖維細胞主要分布于粘膜層中的固有層、黏膜下層和外膜層。成纖維細胞是結締組織中最常見的細胞，電鏡下，成纖維細胞胞質內可見豐富的粗面內質網、游離核糖體和高爾基復合體，表明其具有合成和分泌蛋白質的功能。己知成纖維細胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細胞外基質，在

人原代胃平滑肌細胞產品介紹2025/05/23

人原代胃平滑肌細胞GastricSmoothMuscleCells貨號：HUM-YJ-d005價格：6930.0規(guī)格：1*105細胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經、血管和淋巴管的分布。其中平滑肌主要位于肌層中，胃的肌層發(fā)達，由內斜、中環(huán)和外縱三層平滑肌構成。其中，中層環(huán)形平滑肌在幽門處增厚，形成幽門括約肌，具有節(jié)制胃內容物排出的作用。胃動力性疾病的發(fā)生與平滑肌的收縮性的改變密切相關，現已有充分證據說明，Cajal間質細胞是胃部運動的起搏細胞，

培養(yǎng)基配方2025/05/21

培養(yǎng)基配方常用培養(yǎng)基（1）血液瓊脂（血平板）：【配方一】成分：普通營養(yǎng)瓊脂90rot；脫纖維羊血(或兔血)10ml。制法：將已滅菌的普通營養(yǎng)瓊脂(pH7.6加熱融化；冷卻至50℃左右，以無菌手續(xù)加入10ml脫纖維羊血（臨用前置37℃水浴箱預溫），輕輕搖勻（勿使有氣泡），傾注于滅菌平皿內，每一平皿(直徑9cm)13～15ml或分裝試管，制成斜面；待凝固后，抽樣置37℃培養(yǎng)18～24h，觀察有無細菌生長；如無菌生長，置4℃?zhèn)溆??！九浞蕉砍煞郑喝飧鄿?pH7.8)800ml；硫酸鎂(493g/L)8

人原代食管成纖維細胞性能特點2025/05/21

人原代食管成纖維細胞EsophagealFibroblastsCells貨號：HUM-YJ-d003價格：6960.0規(guī)格：1*105細胞詳述食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，其中外膜主要都是成纖維細胞構成的疏松結締組織，食管通過其與食管周圍的器官相連。黏膜下層,為厚的疏松結締組織構成,內部包含食管腺，可分泌粘液排入食管腔。食管癌的發(fā)生中由正常成纖維細胞轉化而來的活化的癌相關纖維母細胞是腫瘤間質微環(huán)

人原代直腸成纖維細胞性能特點2025/05/21

人原代直腸成纖維細胞RectalFibroblastsCells貨號：HUM-YJ-d020價格：7190.0規(guī)格：1*105細胞詳述直腸是自肛緣起向上15cm的一段大腸。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側。直腸橫切面由內到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，腫瘤間質對腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著重要作用。成纖維細胞是腫瘤間質的重要組成成分,與腫瘤復發(fā)、轉移等密切相關。腫瘤間質中成纖維細胞活化為癌相關成纖維細胞是腫瘤細胞-