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上海復(fù)祥生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
ATCC 的細(xì)胞2022/11/03
來(lái)自ATCC的細(xì)胞培養(yǎng)指南(精簡(jiǎn)版)每天對(duì)待細(xì)胞那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了。如果手里有一份來(lái)自機(jī)構(gòu)ATCC的《細(xì)胞培養(yǎng)指南》,養(yǎng)細(xì)胞可就得心應(yīng)手多了。下面是細(xì)胞培養(yǎng)指南(精簡(jiǎn)版),值得收藏。綜述細(xì)胞要么在培養(yǎng)瓶表面貼壁生長(zhǎng)(錨定依賴性)要么懸浮生長(zhǎng)(非錨定依賴性)。細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂,通常遵循一個(gè)由四個(gè)階段組成的特征性增長(zhǎng)模式:停滯期,對(duì)數(shù)期(指數(shù)期),平穩(wěn)期(平臺(tái)期)和衰退期。停滯期——將細(xì)胞接種至培養(yǎng)瓶之后,細(xì)胞逐步恢復(fù)的同時(shí),緩慢生長(zhǎng)。對(duì)數(shù)期(指數(shù)期)——細(xì)胞進(jìn)入一
4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞2022/10/21
細(xì)胞名稱:4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞介紹:4T1是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥(niǎo)嘌噙抗性細(xì)胞株。當(dāng)注射到BALB/c小鼠中時(shí),4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤,可轉(zhuǎn)移到肺,肝,淋巴結(jié)和大腦,同時(shí)在注射部位形成始發(fā)灶。誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移時(shí)不需要摘除始發(fā)灶。4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞在BALB/c小鼠中的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動(dòng)物模型。4T1-誘導(dǎo)的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動(dòng)力學(xué)相近,可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。跟其他腫瘤模型相比,由于4T1的抗6-硫鳥(niǎo)嘌噙特性,微小
細(xì)胞是什么?2022/07/29
生物的最基本單位是細(xì)胞。細(xì)胞有大有小,大的如鳥(niǎo)蛋,可達(dá)10厘米,小的如支原體,只有千萬(wàn)分之一毫米,用電子顯微鏡才能看見(jiàn)。由于生物的基本結(jié)構(gòu)是細(xì)胞,它的構(gòu)造就決定了它的功能。細(xì)胞一般由細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核組成。較低等的原核生物沒(méi)有細(xì)胞核,相當(dāng)于核的物質(zhì)只有分布在細(xì)胞質(zhì)中間。植物的細(xì)胞膜外面,還有一層堅(jiān)硬的細(xì)胞壁。細(xì)胞膜的主要成分是蛋白質(zhì)和脂類(lèi),其作用主要是把細(xì)胞與外界隔開(kāi),保持相對(duì)穩(wěn)定,又可以同外界進(jìn)行物質(zhì)、能量和信息的交流。細(xì)胞質(zhì)位于細(xì)胞膜與細(xì)胞核之間,主要成分除了透明質(zhì)之外,其中還有許多細(xì)胞
細(xì)胞周期分為哪幾個(gè)時(shí)期2022/06/29
細(xì)胞周期一般從大層面上講是可以分為間期和分裂期。間期中又可以分為三期,分別是DNA合成前期、DNA合成器、DNA合成后期,下一個(gè)就是細(xì)胞的有絲分裂了,有絲分裂的過(guò)層中,又可以分為前期、中期、后期和末期。對(duì)于每個(gè)細(xì)胞的存在,都會(huì)有它的周期。(一)間期間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期).1.G1期此期長(zhǎng)短因細(xì)胞而異.體內(nèi)大部分細(xì)胞在完成上一次分裂后,分化并執(zhí)行各自功能,此G1期的早期階段特稱G0期.在G1期的晚期階段,細(xì)胞開(kāi)始為下一次分裂合成D
無(wú)血清培養(yǎng)基的發(fā)展、優(yōu)化和應(yīng)用2022/06/24
1.無(wú)血清培養(yǎng)基發(fā)展歷程隨著生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)和生命科學(xué)基礎(chǔ)研究對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模、效率和安全性能要求的不斷擴(kuò)大和提高,無(wú)血清培養(yǎng)基的研制和開(kāi)發(fā)已經(jīng)成為細(xì)胞工程領(lǐng)域的重要課題。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展已有60多年的歷史,其中經(jīng)典培養(yǎng)基(ClassicalMedia,CM)主要是指20世紀(jì)五六十年代一些公開(kāi)配方的傳統(tǒng)培養(yǎng)基,如MEM、M199、DMEM、RPMI1640、DMEM/F12等,此類(lèi)培養(yǎng)基需要配合10%左右的牛血清才能使用。由于牛血清成分復(fù)雜、批次間差異較大,培養(yǎng)過(guò)程中有外源物污染的風(fēng)險(xiǎn),因此科
查找一個(gè)特定細(xì)胞株的培養(yǎng)條件2022/06/10
培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)中*的營(yíng)養(yǎng)成分,但是基礎(chǔ)的培養(yǎng)基卻給實(shí)驗(yàn)者帶來(lái)了一系列的問(wèn)題。別小看細(xì)胞培養(yǎng),這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。1.怎樣查到一個(gè)特定細(xì)胞株的相關(guān)知識(shí)和培養(yǎng)條件?ATCC(AmericanTypeCultureCollection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開(kāi)ATCC網(wǎng)頁(yè)的Cellsandhybridomas鏈接,輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)庫(kù)中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,包括細(xì)胞的來(lái)源,培養(yǎng)和凍存條件,以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。2.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?培養(yǎng)某類(lèi)型細(xì)胞沒(méi)有固
細(xì)胞株細(xì)胞系2022/06/10
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別,列表說(shuō)明時(shí)間:2020/4/10閱讀:1細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別,列表說(shuō)明我來(lái)答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:一、概念不同1、細(xì)胞株:細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(CellStrain)。2、細(xì)胞系:細(xì)胞系(cellline)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。二、形成方法不同1、細(xì)胞株:通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲
什么叫細(xì)胞?2022/05/27
細(xì)胞是生物體的基本結(jié)構(gòu)和功能單位。在人類(lèi)目前已發(fā)現(xiàn)的生物中,(除病毒外)所有生物都是由細(xì)胞構(gòu)成的。病毒雖然不是細(xì)胞,但同樣需要在細(xì)胞中活動(dòng)。細(xì)胞可以分為兩大類(lèi),一類(lèi)是原核細(xì)胞,一類(lèi)是真核細(xì)胞。原核細(xì)胞形成的生物都是單細(xì)胞生物,細(xì)菌就是最常見(jiàn)的原核生物?!思?xì)胞結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞由原核細(xì)胞進(jìn)化而來(lái),但是比原核細(xì)胞要先進(jìn)得多?,F(xiàn)在地球上所有肉眼可見(jiàn)的生物都是由真核細(xì)胞形成的?!婧思?xì)胞結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的主要區(qū)別在于是否有細(xì)胞核,原核細(xì)胞沒(méi)有核膜,遺傳物質(zhì)集中在擬核區(qū),裸露在外,真核細(xì)胞含有被核膜包
培養(yǎng)基的分類(lèi)有哪些?2022/04/28
培養(yǎng)基一般分類(lèi)為物理分類(lèi)、化學(xué)分類(lèi)、微生物分類(lèi)。一、物理分類(lèi)。1、液體培養(yǎng)基:其80%-90%是水,是配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2、固體培養(yǎng)基:配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì),根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3、半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4、脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。二、化學(xué)分類(lèi)。1、天然培養(yǎng)基:是指一類(lèi)利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。2、組合
細(xì)胞難伺候,你真的會(huì)選培養(yǎng)基嗎?2022/03/25
培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明,配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下儲(chǔ)存,如低溫、干燥和避光,所有的容器應(yīng)密封,尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明外,還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性檢查試驗(yàn)的質(zhì)控菌和用途。為保證培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)方法2020/08/27
細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)方法1.凍存細(xì)胞的復(fù)蘇應(yīng)遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37-37。5度,取出凍存的細(xì)胞迅速放入后將細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化。在無(wú)菌臺(tái)內(nèi)將*培養(yǎng)基加入50ml的小培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),約5ml左右,然后用無(wú)菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞,置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃,使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。2.傳代:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置3
細(xì)胞株和細(xì)胞系的不同2020/04/11
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別,列表說(shuō)明我來(lái)答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:一、概念不同1、細(xì)胞株:細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(CellStrain)。2、細(xì)胞系:細(xì)胞系(cellline)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。二、形成方法不同1、細(xì)胞株:通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。2、細(xì)胞系:經(jīng)過(guò)40
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)(入門(mén)級(jí))2020/03/18
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)(入門(mén)級(jí))總的原則:無(wú)菌操作、保證細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性按時(shí)間順序整理1、細(xì)胞房和生物安全柜(或超凈工作臺(tái))先開(kāi)紫外照射30min。作用:對(duì)環(huán)境滅菌(空氣)。(備注:如果著急,至少也要開(kāi)15分鐘)在做實(shí)驗(yàn)之前考慮好需要哪些物品。開(kāi)始照射之前,將所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超凈工作臺(tái))里面。常用移液槍或電動(dòng)移液器等,需要在工作臺(tái)上放置一套設(shè)備。細(xì)胞培養(yǎng)箱一般都已經(jīng)調(diào)整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時(shí)更換。2、顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意:顯微鏡一般都放在細(xì)胞房。
STR細(xì)胞鑒定意義2018/11/30
STR細(xì)胞鑒定意義導(dǎo)讀:新買(mǎi)到的細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)室傳了幾代的細(xì)胞,又或者儲(chǔ)存于超低溫冰箱幾年不用的細(xì)胞,被污染了么?鑒定正確么?用它做研究會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果么?沒(méi)有經(jīng)過(guò)相應(yīng)的細(xì)胞鑒定,使用了被污染的細(xì)胞,經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗(yàn),寫(xiě)出一篇論文,但是結(jié)論被推翻,論文被召回,大量的時(shí)間、物力和人力被浪費(fèi),一切都要從頭再來(lái)。背景介紹應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的哺乳動(dòng)物細(xì)胞被錯(cuò)誤鑒定和交叉污染的問(wèn)題,一直是一個(gè)普遍存在的突出問(wèn)題。據(jù)統(tǒng)計(jì),國(guó)外實(shí)驗(yàn)室有20%左右的細(xì)胞株被錯(cuò)誤鑒定和交叉污染,NIH和ATCC近兩年都對(duì)此發(fā)出呼吁,
細(xì)胞養(yǎng)不好?這些注意事項(xiàng)請(qǐng)收好(三)2018/11/28
【技術(shù)文章】細(xì)胞養(yǎng)不好?這些注意事項(xiàng)請(qǐng)收好(三)1、購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因?細(xì)胞冷凍管解凍后,為何會(huì)有細(xì)胞數(shù)目太少的情形?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于–80℃太久。研究人員在冷凍細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,
人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP2018/04/20
人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP特征特性該細(xì)胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結(jié)細(xì)針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細(xì)胞的生長(zhǎng)和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細(xì)胞不形成均一的單層而是成簇生長(zhǎng),所以傳代的時(shí)候要反復(fù)吹打形成單個(gè)細(xì)胞;該細(xì)胞貼壁不牢,達(dá)不到匯合狀態(tài),而且會(huì)使培養(yǎng)基迅速變酸;傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時(shí)挪動(dòng)培養(yǎng)瓶,會(huì)使大部分細(xì)胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況,需要重新孵育24~48h使細(xì)胞重新貼
菌種保藏的方法2018/02/26
菌種是主要的生物資源,也是食用菌生產(chǎn)首要的生產(chǎn)資料。一個(gè)優(yōu)良的菌種被選育出來(lái)以后,必須保持其優(yōu)良性狀不變或盡可能地少變慢變,才不至于降低生產(chǎn)性能,能長(zhǎng)期在生產(chǎn)中使用。因此,菌種保藏在食用菌生產(chǎn)上具有重要的意義。各種微生物由于遺傳特性不同,因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏方法,首先應(yīng)能保持原菌種的優(yōu)良性狀長(zhǎng)期不變,同時(shí)還須考慮方法的通用性、操作的簡(jiǎn)便性和設(shè)備的普及性。下面介紹幾種常用的菌種保藏方法:(一)斜面低溫保藏法將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,待菌種生長(zhǎng)*后,置于4℃左右的
養(yǎng)好細(xì)胞注意點(diǎn)(三)2017/05/10
(一)如何避免細(xì)胞污染細(xì)胞污染的種類(lèi)可分成細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒等。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染的血清和污染的細(xì)胞等。嚴(yán)格無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好的細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染的方法。(二)支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響不能以肉眼觀察出支原體污染異狀。除極有經(jīng)驗(yàn)的專(zhuān)家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無(wú)法以其外觀分辨。支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞的生長(zhǎng)參數(shù),代謝及研究任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-
養(yǎng)好細(xì)胞注意點(diǎn)(二)2017/03/24
(一)何時(shí)須更換培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素。視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中可以添加抗生素。按1%體積分?jǐn)?shù)加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100U/mL和100μ/mL。(二)貼壁細(xì)胞傳代時(shí)所使用的trypsin-EDTA濃度及相應(yīng)處理一般使用的trypsin-EDTA濃度為0.25%trypsin-0.53mMEDTA.4Na。*次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于–20℃,避免反
如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板?2017/03/21
細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī)??纱罂尚?,你既可以使用生物反應(yīng)器,也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今,利用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)模式正倍受青睞,因?yàn)檫@有助于研究多個(gè)動(dòng)態(tài)變量,減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并節(jié)約昂貴的試劑。除了標(biāo)準(zhǔn)的高通量微孔板,還有一些特殊的微孔板被開(kāi)發(fā)出來(lái),助力3D和器官型細(xì)胞培養(yǎng)。市場(chǎng)上的細(xì)胞培養(yǎng)板可不少,如何選擇合適的呢?在這篇文章中,BrandTechScientific的產(chǎn)品專(zhuān)家介紹了細(xì)胞培養(yǎng)中塑料制品的選購(gòu)要點(diǎn)。在他們看來(lái),我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。1.孔的數(shù)量大多數(shù)用戶在組
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