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PCR反應技術的反應基本步驟2023/04/16
1、變性90~94℃的高溫處理可使模板DNA雙鏈間氫鍵斷裂,解離成單鏈但不改變其化學性質,變性的時間一般為30s,如果模板的G+C含量較高,變性時間可能延長。2、退火退火的溫度一般降低至25~65℃。在退火過程中,引物分別與待擴增的DNA片段的兩條鏈的3'端互補配對。退火的溫度取決于引物的Tm值,并通過預備試驗來最后確定。一般引物越短,其Tm也越低,對于10bp左右的隨機引物,退火溫度在37℃左右,反之則高。退火溫度越高,引物與模板結合的特異性增強,非特異性的擴增概率降低,但擴增效率也隨之降低。
如何設置梯度PCR2023/04/16
1、打開PCR儀,再找到一個普通PCR程序,以備改動(也可以自行重新編輯)2、按enter鍵打開PCR普通程序,按”編輯“進入程序編輯狀態(tài),按“Tab”鍵將編輯區(qū)域調節(jié)至右側選擇是否進行梯度PCR選項,選擇“是”3、選擇梯度PCR后按Tab鍵回到左邊程序,點擊下一步進行編輯,此時可看到整個程序界面,找到退火溫度,在下方“±0.00”℃的地方輸入你想進行的梯度區(qū)間,例如61±5℃4、編輯好后保存按ESC返回主界面,找到與程序菜單并列的梯度菜單,點擊進入,將中心溫度調至與剛剛設置的溫度一致,例如上述
ers-2細胞電阻儀器使用方法2022/11/21
1.固定電極和可變電極的區(qū)別MERS00002中包含固定電極,但不包含可變電極。固定電極(MERSSTX01)的兩個電極的高度差是固定的。對于可變電極,可以通過調節(jié)長電極的高度調節(jié)兩個電極之間的高度差。固定電極適用于除96孔板以外的所有Millicell小室。使用Corning的Transwell,小室底面與孔板底面距離更大,建議購買可變電極,貨號為MERSSTX03。胞電壓和電阻時,屏幕顯示的數(shù)值左右擺動,不穩(wěn)定確保電阻儀與電源斷開;電量不能過低;細胞平衡到室溫(半個小時以上,溫度會影響電阻值
PCR儀的使用步驟及原理2022/10/11
PCR儀是為滿足當今分子生物實驗室的需求所設計。高品質的光學器件、可靠的溫度控制系統(tǒng)及嚴格的生產(chǎn)工藝確保儀器可靠性、精度和準確度。PCR儀主要功能包括多通道PCR檢測,熔解曲線及數(shù)據(jù)分析管理等。儀器可以使用條形管或單個PCR管進行PCR反應。PCR儀的操作步驟:1、準備好樣品,分別分裝于200微升的離心管里;2、接通PCR儀的電源,打開PCR儀的開關,使儀器初始化;3、打開儀器的加熱板,放入需要進行反應的樣品;4、從儀器主頁面中選擇自己的使用文件夾;5、選擇合適的運行程序,點擊開始按鈕;6、根據(jù)
電泳儀電泳槽的常用使用方法2022/09/20
電泳儀:電泳技術是分子生物學研究不可少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學領域中*常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據(jù)這一特征,應用電泳法便可以對不同物質
生物安全柜性能解疑2022/05/19
一些人或許認為,生物安全柜不過是一個裝有風機和一些HEPA過濾器的鐵箱子;事實上生物安全柜要復雜得多。同樣,保持生物安全柜的安全性能也遠比“定期更換過濾器”復雜得多。本文旨在為大家在安全柜安全性能原理上破疑解惑,為實驗室工作人員、管理人員和其他涉及安全柜使用維護的相關人員在工作中給予指導。過濾器過濾器是生物安全柜中的關鍵組成,主要起到過濾細菌和灰塵顆粒的作用,以凈化吹入安全柜工作區(qū)和排放出的氣體。安全柜里所使用的過濾器一定要有足夠的過濾效率,否則就起不到防護生物危害的作用。過濾器材料應采用硅酸鹽
離心機在日常使用過程中的科學維護說明2022/03/22
離心機主要利用其轉子高速旋轉產(chǎn)生的強大離心力,讓液體中的顆粒快速沉降下來,從而把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質分離開的設備,在醫(yī)藥、生物醫(yī)學等領域發(fā)揮著舉足輕重的作用。近年來,隨著醫(yī)藥等行業(yè)的不斷發(fā)展,離心機市場規(guī)模也在不斷擴大。有專家指出,未來五年,離心機行業(yè)將迎來巨大的變革。在此背景下,制造企業(yè)需要致力于技術研發(fā),打造更多新型的設計理念、加強技術創(chuàng)新,研發(fā)出更多新的離心機以滿足市場的需求。良好的離心機是保證設備穩(wěn)定運行,高質量分離的關鍵。而在使用的過程中,用戶也有必要知曉離心機的相關的知
冷凍離心機分類及試管破裂原因分析幾條2022/03/22
低溫離心機是利用運轉時產(chǎn)生的離心力使溶液中的懸浮微??焖俪恋淼纳瘍x器,在醫(yī)學、衛(wèi)生防疫等行業(yè)常用。但低溫離心機在使用中常因試管破裂而導致離心失敗,有時會損失珍貴的樣品,臨床上還引起醫(yī)療糾紛。實踐表明,低溫離心機試管破裂更是大多數(shù)與人的因素有關。常見的問題有:1.負荷不平衡放置在對稱套孔中的樣品,必須連試管一并用天平調整重量達到平衡。若僅用一只試管放樣品,對稱試管中必須加水予以平衡,否則離心時低溫離心機會震動而使試管破裂。容易被忽視的是,水平轉頭的離心杯長期使用或更換后會失衡,故離心杯也要配平。
艾本德5810r離心機使用方法簡要步驟2022/03/22
eppendorf離心機5810R操作步驟:1.連接電源,打開儀器旁邊的開關。2.根據(jù)盛放樣品的離心管的大小,安放轉子,用六角扳手按順時針方向上緊,將離心管平衡放入,蓋上轉頭蓋(大轉頭的蓋子應該旋緊),正確關上離心機蓋子,使“Open”鍵上的指示燈變亮。3.通過Speed鍵、Time鍵、Temp鍵和▲、▼鍵來調整離心的參數(shù)。以Speed的設定為例,按Speed鍵使速度值呈現(xiàn)閃爍狀態(tài),再用▲、▼鍵來更改數(shù)值;如果要設定離心力(rcf),重復按Speed鍵直到離心力符號(*)出現(xiàn)在速度值的左邊,便可
Countess II 細胞計數(shù)儀操作方法2022/03/22
操作指南拆開CountessII包裝,設置演示設備打開包裝盒,取出附件包裝盒,拆開CountessII設備的包裝插上CountessII插頭,將USB驅動器插入儀器前方的USB端口內。打開儀器電源儀器將顯示“開始”(Start)界面,指導用戶插入計數(shù)板。設備現(xiàn)在可進行計數(shù)。從包裝紙中取出Countess計數(shù)板保存包裝紙,以供后面的細胞溶液(若使用)與臺盼藍活性染料稀釋使用混勻細胞/微珠——晃動并上下吹打(渦旋振蕩)吸取10uL細胞樣本至包裝紙上在包裝紙上加入10uL臺盼藍染料至細胞/微珠樣本中(
伯樂gene pulser xcell電穿孔儀操作注意事項2022/03/14
注意事項關閉shockpod蓋再電擊,操作過程中不要與電極接觸,建議在一定的防護下操作儀器(如眼鏡,手套和防護服等)。避免有液體與shockpod接觸,放置漏電。如果要清潔電極,可以在保證儀器關機狀態(tài)下,用紙巾或者棉簽清潔電極。防止有腐蝕性液體接觸儀器表面。點擊杯中液體不要有氣泡。電壓設定根據(jù)實際樣品設定,否則可能會導致細胞死亡。保持實驗室溫度適中。溫度高于35攝氏度時會影響儀器正常工作。轉移儀器時,插孔需要注意PC,CE模塊不可以插反,否則會對儀器產(chǎn)生無法恢復的影響。如果發(fā)現(xiàn)儀器線路有破損,停
高速離心機與高速冷凍離心機的區(qū)別方法2021/04/09
高速離心機和高速冷凍離心機最大的區(qū)別是一個具有冷凍功能,一個不具備冷凍功能。高速離心機屬常規(guī)實驗室用離心機,廣泛用于生物,化學,醫(yī)藥等科研教育和生產(chǎn)部門,它利用轉子高速旋轉產(chǎn)生的強大離心力,分離液體與固體顆?;蛞后w混合物中各組分,適用于微量樣品快速分離合成。由于轉速較高,產(chǎn)生離心力大,是對樣品溶液中懸浮物質進行高純度分離、濃縮、精制,提取各種樣品進行研究的有效制備儀器。是醫(yī)學、藥物學、生物學、化學、農(nóng)業(yè)科學、食品環(huán)保等科研生產(chǎn)部門使用的重要儀器設備,廣泛用于各種藥物、生物制品,如血液、細胞、蛋白
離心機常見的分類方式2021/04/09
離心機自問世以來,歷經(jīng)低速、調整、超速的變遷,其進展主要體現(xiàn)在離心機設計和離心技術兩方面,二者相輔相成。由于臺式離心機結構簡單,造價低,體積小,很快成為常規(guī)實驗室儀器,國內外*離心機廠商幾乎都生產(chǎn)臺式離心機,如近幾年來在我國比較活躍的德國賀利氏Hheraeus,艾本德eppendof,西格瑪Sigma,海蒂詩Hettich,賀默Hermle,美國的貝克曼Beckman,Thermo賽默飛世爾,日本的日立Hitachi,日本久保田Kubota等,國內的湘儀離心機、赫西離心機、湘智離心機等。從轉速看
旋光儀的操作2021/03/30
自動旋光儀是測定物質旋光度的儀器。通過對樣品旋光度的測定,可以分析確定物質的濃度、含量及純度等.自動旋光儀采用光電檢測器及電子自動示數(shù)裝置,具有體積小、靈敏度高,沒有人差,讀數(shù)方便等特點。對目視旋光儀難以分析的低旋光度樣品也能適應。因此廣泛應用于醫(yī)藥、食品、有機化工等各個領域。農(nóng)業(yè):農(nóng)用抗菌素、農(nóng)用激素、微生物農(nóng)藥及農(nóng)產(chǎn)品成份分析。醫(yī)藥:抗菌素、維生素、葡萄糖等藥物分析,中草藥藥理研究。食品:食糖、味精、醬油等生產(chǎn)過程的控制及成品檢查,食品含糖量的測定。石油:礦物油之分析、石油發(fā)酵工藝的監(jiān)視。香
全自動旋光儀的使用方法及維護技巧2021/03/30
旋光儀主要用于測定旋轉角及國際標準糖度。所謂測定旋轉角是可以通過測量藥品、香料化工原料等的比旋光度來確保品質和產(chǎn)品的安全性。旋光儀可以用來測定樣品水溶液的旋轉角或旋光度。比旋光度是特定溫度和波長下的某種物質的固有特性,可以通過眩光管長度,旋轉角,濃度計算得出。國際標準糖度被用來在制糖過程中確定粗糖的純度,使用旋光儀上的“國際標準糖度”功能測定樣品,測定顯示值則為樣品的國際標準糖度值。旋光儀應用于制藥行業(yè)中藥物原材料及成品的旋光度測量、精細化工行業(yè)化合物或香精香料仲光學活性物質的成分的測量、食品行
美國伯樂iMark酶標儀操作使用方法2021/03/30
一步:接上電源,打開后面開關,iMark酶標儀開啟后,自檢后,根據(jù)機器上地提示,輸入00000后按輸入鍵即可進入地操作界面。第二步:如果試驗地程序已編好,則按MemoryRecall可直接調出在儲存檢索菜單里的程序,直接讀板。如果試驗的程序需要重新編輯,則按Edit編輯菜單里面的程序設置,進行新的試驗程序的編輯。第三步:編輯新程序:按Edit編輯菜單,首*入程序設置,里面需要進行編輯的有以下幾個分菜單:1.閾值設置;2.報告種類設置;3.標準品設置;4.試驗模式設置5.酶標板布局設置。定性試驗一
eppendorf5810r離心機故障分析與排除2021/03/28
根據(jù)維修手冊.“E29”代碼解釋為Motordoesn'tturn電動機不能運轉),“E40”代碼解釋Accelerationoftheunitistooslow(加速過慢)。此機器已使用超過3年且沒有做過內部除塵.首先分析故障原因可能是主板上灰塵太多.導致機器過熱保護。拆開機器外殼,進行除塵后開機測試,工作正常。為了確認故障是否真正排出,進行連續(xù)試機.20min后又出現(xiàn)同樣故障。因伴隨故障現(xiàn)象的2條代碼都與電動機旋轉相關,根據(jù)電路圖重點對電動機旋轉驅動部分進行分析(見圖1):驅動信號經(jīng)光耦控制
艾本德離心機5424r的使用方法2021/03/28
1、eppendorf離心機TACH報警故障故障現(xiàn)象離心機停止運轉,故障顯示屏出現(xiàn)TACH閃爍,TACH報警是離心機的速度檢測電路故障引起。故障電路分析速度檢測電路的主要作用是檢測離心轉子和離心轉軸的速度,由于超速離心機的離心轉子速度較高,為確保速度檢測的可靠性,采用2對光電對管DL、T1和D2、T2分別對安裝在離心轉軸和離心轉子上的速度環(huán)進行檢測,獲得離心轉軸和離心轉子的各自實際速度信號。為確定速度檢測是否處于正常狀態(tài),電路中加入光電管檢測電路,主要用于光電對管的狀態(tài)監(jiān)控,通過電阻R1向光電管
pcr應用中確認RNA的質量常用的三種方法2021/03/28
實時熒光定量PCR技術是通過測定RNA的轉錄水平來評估基因的活力。RNA樣本提取的質量直接影響基因表達分析。影響RNA品質的因素有以下三種:RNA濃度、RNA純度和RNA完整性。檢測RNA濃度、純度和完整性的方式主要有以下幾種:紫外分光光度計法:測量260nm吸收值計算RNA濃度,測量260nm/280nm吸收值的比值,用于評估RNA純度。需要注意的是:在檢測核酸物質時應該在固定的PH溶液中進行。260nm/280nm的比值范圍在1.9~2.1之間。<1.9,說明有蛋白質殘留;>2.1,說明RN
美國密理博細胞電阻儀使用方法2021/03/28
上海旦鼎對MERS00002型細胞電阻電壓歐姆儀使用方法簡要闡述:操作簡要說明注意:充電時不要使用儀表進行測量!在所有操作前需斷開充電電源。1.校正電阻儀STX04電極插入儀表,打開電源,模式置于歐姆檔,儀表若顯示1000Ω為正常無需調整,不是用螺絲刀調節(jié)RAdj使儀表讀數(shù)為1000Ω.模式置于毫伏檔,儀表讀數(shù)為0.2.平衡電極測量電壓時需先平衡電極。STX01電極插入儀表,關閉電源,模式置于歐姆檔,使用PBS,0.15MNaCl或0.1MKCl溶液進行平衡,針對不同的儲存方法有不同的平衡時間。
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