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產(chǎn)品名稱：ProteanFect CRISPR Ultra 轉(zhuǎn)染試劑盒

產(chǎn)品貨號：PT07

產(chǎn)品品牌：西湖凝聚體

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產(chǎn)品簡介

ProteanFect CRISPR Ultra 轉(zhuǎn)染試劑是 ProteanFect 系列產(chǎn)品中專為難轉(zhuǎn)細(xì)胞系基 因編輯而設(shè)計(jì)的產(chǎn)品。該試劑盒基于自組裝蛋白納米顆粒，為一種非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì) 體的轉(zhuǎn)染試劑，能夠更高效且安全地將基因編輯工具 RNP（Cas9 protein 和 guide RNA） 遞送至細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)高效的基因編輯。

試劑盒儲(chǔ)存與成分說明

ProteanFect CRISPR Ultra 轉(zhuǎn)染試劑采用干冰運(yùn)輸，收到后應(yīng)存放于 -80℃，直至使 用。

試劑盒規(guī)格依據(jù) Reagent B 的體積設(shè)定。試劑盒內(nèi)配備陽性對照樣品，其中含有編碼 綠色熒光蛋白（EGFP）的 mRNA，可用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)操作流程和轉(zhuǎn)染效率；同時(shí)還有靶向人 TRAC 基因的 sgRNA，以此來檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)操作以及試劑質(zhì)量。開封后，為保障試劑性能處于 優(yōu)良狀態(tài)，各組分應(yīng)依據(jù)表 1 所列存儲(chǔ)條件妥善存放。

產(chǎn)品名稱：ProteanFect CRISPR Ultra 轉(zhuǎn)染試劑盒

產(chǎn)品貨號：PT07

產(chǎn)品品牌：西湖凝聚體

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常見問題

1. 如何提升轉(zhuǎn)染效率

轉(zhuǎn)染條件需根據(jù)細(xì)胞類型和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。建議：1）延長轉(zhuǎn)染時(shí)間：根據(jù)細(xì)胞狀 態(tài)適當(dāng)延長轉(zhuǎn)染時(shí)間。通常細(xì)胞系不超過 2 小時(shí)。2）升 ProteanFect 轉(zhuǎn)染量：適當(dāng)增加 轉(zhuǎn)染體系至初始的 1.5-2.5 倍。

2. 細(xì)胞系轉(zhuǎn)染前處理

1）為獲得良好的轉(zhuǎn)染效率，建議使用活性超過 90%的細(xì)胞，可以通過臺(tái)盼藍(lán)染色測定 細(xì)胞活性。2）不建議使用傳代次數(shù)超過 15 次的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3）新復(fù)蘇的細(xì)胞在轉(zhuǎn)染實(shí) 驗(yàn)前需傳代 2-3 次，待細(xì)胞恢復(fù)正常生長后使用。

3. 關(guān)于試劑盒中 EGFP mRNA 陽性對照的使用建議 首·次嘗試時(shí)，建議設(shè)置陽性對照組（EGFP mRNA），以檢測實(shí)驗(yàn)操作和試劑的有效性。 使用 96 孔板的細(xì)胞量即可，節(jié)省細(xì)胞和試劑。